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紫陌依然

铁虫 (初入文坛)

[求助] 霉菌的最低抑制浓度用什么方法测?

想请教下怎么测定霉菌的最低抑制浓度?我目前看到的方法主要有:
①肉汤连续稀释法,肉眼观察不到菌生长的第一管抑菌剂的浓度浓度为MIC;
②平板计数法,没有菌落生长或者少于5个的为MIC;
③抑菌圈法,出现抑菌圈的浓度为MIC;
以前没有怎么做过微生物实验,更没做过霉菌实验,所以现在有点混乱,不知道这些方法实际操作起来是否可行,有没有哪位比较了解的可以教一下
还有,用96孔板做微量肉汤稀释法可以用于霉菌吗?
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phoenix.ren

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
紫陌依然: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-05-15 10:41:30
我用96孔版做过曲霉的MIC测定。当时培养了48小时,效果很明显。
用的是1640培养基,不过其它真菌培养基也是可以的。
做的时候需要取孢子液,我用的是一个DNA提取吸附柱,把里面的膜掏了,再放上一小团棉花,最后灭菌,这样的一个自制的过滤孢子液的柱子。然后把平板上长好的曲霉刮取到无菌水(生理盐水也可以),再用刚才的柱子过滤,得到孢子液,去计数,就可以进行微量稀释法检测了。
抑菌圈的话也做过,但是对要检测的药物消耗太大。是先用孢子液涂平板,然后把检测的药物滴到纸片上,再放到平板上,然后培养,观测抑菌圈。
我的tips都告诉你了,男的我都不告诉的。。。
6楼2015-05-13 17:50:01
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普通回帖

紫陌依然

铁虫 (初入文坛)

求回答

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-05-09 18:42:32
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

抑菌圈法。可以的。

[ 发自小木虫客户端 ]
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
3楼2015-05-11 09:29:54
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紫陌依然

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2015-05-11 09:29:54
抑菌圈法。可以的。

可以做霉菌吗?霉菌的话是多久以后测定呢也是24小时吗?判断标准是什么呢?不好意思,我懂的不多,求指教……
4楼2015-05-12 17:02:25
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

引用回帖:
4楼: Originally posted by 紫陌依然 at 2015-05-12 17:02:25
可以做霉菌吗?霉菌的话是多久以后测定呢也是24小时吗?判断标准是什么呢?不好意思,我懂的不多,求指教……...

霉菌的话条件要自己摸索。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
5楼2015-05-12 22:02:00
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紫陌依然

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by phoenix.ren at 2015-05-13 17:50:01
我用96孔版做过曲霉的MIC测定。当时培养了48小时,效果很明显。
用的是1640培养基,不过其它真菌培养基也是可以的。
做的时候需要取孢子液,我用的是一个DNA提取吸附柱,把里面的膜掏了,再放上一小团棉花,最后灭 ...

太谢谢你了!我现在也用平板做,看长不长活菌,可是量确实太大了,几个梯度做平行,需要好多好多平板谢谢你了!
7楼2015-05-15 10:40:09
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紫陌依然

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by phoenix.ren at 2015-05-13 17:50:01
我用96孔版做过曲霉的MIC测定。当时培养了48小时,效果很明显。
用的是1640培养基,不过其它真菌培养基也是可以的。
做的时候需要取孢子液,我用的是一个DNA提取吸附柱,把里面的膜掏了,再放上一小团棉花,最后灭 ...

对了,你48小时后是肉眼观察培养基是否浑浊呢还是测OD值的?
8楼2015-05-15 10:42:10
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紫陌依然

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2015-05-12 22:02:00
霉菌的话条件要自己摸索。...

好的,谢谢了!
9楼2015-05-15 10:56:40
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phoenix.ren

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 紫陌依然 at 2015-05-15 10:42:10
对了,你48小时后是肉眼观察培养基是否浑浊呢还是测OD值的?...

肉眼就能看到很明显的MIC。可以用alamar blue染色看一下。测OD不好测,容易成团。
10楼2015-05-19 23:38:43
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