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kallstrom木虫 (小有名气)
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请问α-淀粉酶抑制剂的活性怎么测的？
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我看有产品规格书上写3000 AAIU（α-淀粉酶抑制单位），这个是怎么测出来的？ 各位前辈有知道的吗？ |
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wanglian63
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【答案】应助回帖
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3000 AAIU:3000 alpha amylase inhibiting units α-淀粉酶抑制剂对不同病原真菌的抑制活性测定 一、实验目的 测定α-淀粉酶抑制剂对不同病原真菌的抑制活性，根据测定结果，可以用来研究以α-淀粉酶抑制剂为主要成分配置药物治理作物病原真菌引起的病害。 二、实验原理 α-淀粉酶随机的作用于淀粉的非还原端，最终生成可供生物体直接利用的葡萄糖，在接种有病原真菌的固体培养基上，加入α-淀粉酶抑制剂，可抑制真菌内的淀粉酶活性，从而影响真菌的生长情况，最后通过测量并计算加入不同浓度抑制剂的培养基中的菌落的直径与对照组的直径的比值，可以得到抑制活性百分比。 三、实验材料、仪器、试剂 材料：水稻稻瘟菌、小麦条形柄锈菌、油菜菌核病菌悬液 试剂：新鲜马铃薯、蔗糖、琼脂、自来水、α-淀粉酶抑制剂、 仪器：小铝锅、天平、1000ml刻度搪瓷量杯、菜板、小刀、牛角匙、玻璃棒、分装漏斗、纱布、试管、棉花、电炉、三角瓶、平板培养皿、高压蒸汽灭菌箱、接种环、恒温箱 四、实验步骤 1、培养基的配制： （1）称取去皮新鲜马铃薯200g切成1cm见方小块放于小铝锅中，加1000ml自来水，置电炉上煮沸20min后，用双层纱布过滤。滤液再倒入搪瓷杯中。 （2）称取20g的蔗糖与琼脂，以此加入搪瓷杯中，加热搅拌至琼脂完全融化，并补足水量至1000ml。 （3）趁热分装于5个250ml三角瓶中，每瓶200ml，塞好棉塞后用旧报纸将棉塞部分包扎好，贴好标签装入小铁丝筐。 （4）将12个培养皿、α-淀粉酶抑制剂、一瓶蒸馏水放入121℃高压蒸汽灭菌30min。 2、接种培养： （1）取灭菌的α-淀粉酶抑制剂、蒸馏水，制备稀释10倍与100倍的α-淀粉酶抑制剂。 （2）取无菌平板培养皿12套，分成三组，向每个培养皿中倒入已灭菌的培养基液体，向每组分别加入1ml的无菌水、α-淀粉酶抑制剂、稀释10倍的α-淀粉酶抑制剂、稀释100倍的α-淀粉酶抑制剂，立即轻轻地在台面上沿一个方向摇动，混合均匀，并用记号笔在皿底标记1、2、3、4号。 （3）待培养基凝固后，用接种环蘸取菌悬液接种三种细菌分别接种到三组培养皿中，盖上皿盖，放置20min，再用报纸包好，放入恒温箱中倒置培养10天。 3、观察结果： 从恒温箱中取出培养基，观察菌落生长情况，测量每个培养皿中的菌落直径，并计算每个培养皿中菌落的平均直径，记录数据。 五、原始数据记录 无菌水 抑制剂 稀释10倍的抑制剂 稀释100倍的抑制剂 水稻稻瘟菌 小麦条形柄锈菌 油菜菌核病菌 六、实验结果及分析 α-淀粉酶抑制剂抑制活性=1-实验组菌落直径/对照组菌落直径*100% |
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2013-04-22 13:33:30, 28 K
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kallstrom
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