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moxiaolan33

铁虫 (小有名气)

[求助] DNS试剂配制以及还原糖测定的相关问题 已有2人参与

求助大家,网上搜索到很多关于DNS试剂的配方,可是配制方法都有些差异,这个标准怎样确定。之前按照师兄的论文里写的方法配好,放置一周后使用,发现加了葡萄糖标准溶液后不变色。做标准曲线7支管颜色完全没有差异。是不是配的试剂有问题造成的呢
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fxgowen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在碱性条件下,葡萄糖与DNS(3,5-二硝基水杨酸)试剂反应,葡萄糖被氧化成糖酸及其他产物,DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
DNS试剂配制:准确称取DNS 6.3g于500ml烧杯中,用少量蒸馏水溶解后,加入2mol/LNaOH溶液 262ml,再加到 500ml含有酒石酸钾钠185g的热水溶液中,再加结晶酚 5g和无水亚硫酸钠 5g,搅拌溶解,冷却后移入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至,充分混匀。贮于棕色瓶中,室温放置一周后使用。
沸水中显色5min。用冷水冷却到室温后,加水至25ml,摇匀,再550nm处用分光光度计测定
2楼2015-04-24 13:27:10
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199006287956

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by fxgowen at 2015-04-24 13:27:10
在碱性条件下,葡萄糖与DNS(3,5-二硝基水杨酸)试剂反应,葡萄糖被氧化成糖酸及其他产物,DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
DNS试剂配制:准确称取DNS 6.3g于500ml烧杯中,用少量蒸馏水溶解后,加 ...

配好定容后,需要过滤吧!我们都过滤的。

[ 发自小木虫客户端 ]
追求不惜,奋斗不息
3楼2015-04-25 00:47:57
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第四个shadow

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 199006287956 at 2015-04-25 00:47:57
配好定容后,需要过滤吧!我们都过滤的。
...

过滤什么
4楼2015-05-06 10:33:23
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199006287956

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 第四个shadow at 2015-05-06 10:33:23
过滤什么...

配的试剂里面有小颗粒,过滤掉,防止印象实验结果。

[ 发自小木虫客户端 ]
追求不惜,奋斗不息
5楼2015-05-06 13:42:10
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zmxiaomu

新虫 (初入文坛)

3,5-二硝基水杨酸试剂:准确称取1 g3,5-二硝基水杨酸,溶于20 mL 2 mol/L NaOH溶液中,加入50 mL蒸馏水,再加入30 g酒石酸钾钠,待溶解后用蒸馏水定容至100 mL。盖紧瓶塞,勿使CO2进入。若溶液混浊可过滤后使用。
标准葡萄糖溶液(1 mg/mL):准确称取100 mg无水葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100 mL
6楼2015-05-14 15:56:32
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