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pengqi

金虫 (初入文坛)

[求助] 如何确定基因全长 已有2人参与

求各位大神指点:
      
       本人目前已通过RACE克隆到该基因,但是不知道如何确定是否拿到该基因的全长序列。
      
       主要问题是现在不知如何确定RACE结果是否达到了3‘和5’的顶端,以及3‘UTR和5’UTR部分如何确定。
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个主要是通过Blast比对了,5UTR没有绝对的完整,比对不差太多都可以的,不必较真。3UTR一定要看到polyA。当然,自己的ORF一定要完整
2楼2015-04-23 16:50:52
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
ORF完整,BLAST分析是你要的序列,不用管3‘UTR和5’UTR是否完整。
3楼2015-04-23 17:24:56
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happy_520

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 墨尔本机器 at 2015-04-23 16:50:52
这个主要是通过Blast比对了,5UTR没有绝对的完整,比对不差太多都可以的,不必较真。3UTR一定要看到polyA。当然,自己的ORF一定要完整

ORF BLAST比对是完整的,3‘端测序结果也有polyA,可是老师非要确定3'和5’UTR部分
4楼2015-04-23 19:17:30
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墨尔本机器

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by happy_520 at 2015-04-23 19:17:30
ORF BLAST比对是完整的,3‘端测序结果也有polyA,可是老师非要确定3'和5’UTR部分...

你通过比对告诉他完整就好了啊。
5楼2015-04-24 10:12:23
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吕木木

新虫 (小有名气)

克隆全长基因全长序列时怎么设计引物啊

发自小木虫Android客户端
6楼2015-12-22 20:27:38
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