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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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justsmiling

银虫 (小有名气)

[求助] DNA聚合反应求指导 已有2人参与

分子信标跟引物在聚合酶作用下将分子信标打开，为什么我做的引物跟分子信标的荧光值只能达到分子信标跟其互补链的30%，这个跟哪些因素有关呢
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1楼 2015-04-07 22:06:40
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justsmiling

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by greeneese at 2015-04-08 14:57:11
那就是不方便透露你用的链的序列喽？

很难在不知道这种信息的情况下帮你。...

MB是5’-TAMRA-CCTCTCCGTGTCTTGTACTTCCCGTCAGAGAGG-DABCYL-3’，引物链是5’-GACGGGAAG-3’ ，buf是
50mM Tris-HCl(pH 8.0)，1mM DTT，5mM MgCl2，250uM dNTP，酶我加终浓度为2U/100uL,MB是200nM,引物是300nM的浓度
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6楼2015-04-08 21:18:25
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-04-08 09:32:03
方便透露一下你用的链的序列吗？第一印象是你用的引物链不足以结合在分子信标上。
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2楼2015-04-08 08:32:51
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justsmiling

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by greeneese at 2015-04-08 08:32:51
方便透露一下你用的链的序列吗？第一印象是你用的引物链不足以结合在分子信标上。

我的链是以前师兄做过的，但是他能恢复到80%，我就只能到30%
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3楼2015-04-08 10:57:54
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by justsmiling at 2015-04-08 10:57:54
我的链是以前师兄做过的，但是他能恢复到80%，我就只能到30%...

那就是不方便透露你用的链的序列喽？

很难在不知道这种信息的情况下帮你。
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4楼2015-04-08 14:57:11
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