应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » DNA marker 前端条带模糊，求解决办法。
131/2返回列表12下一页
查看: 4951  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

289363400

铁杆木虫 (知名作家)

凌乱前进方向

[求助] DNA marker 前端条带模糊，求解决办法。 已有5人参与

不知道为什么我的DNA marker 前端条带模糊，我分析可能有以下几个原因，又一一排除了：
1.1×TAE电泳液时间过长，我换了电泳液，不行；
2.EB染色液的问题，重新配制了，还是不行；
3.夏天气温高，条带扩散快，我就这冰浴中跑电泳，还是不行。
4.琼脂糖胶配的很均匀，没有问题。
请各位高手不吝指教，多谢多谢！
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 2014071503.bmp
    • 2014-07-16 22:09:54, 1.25 M

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-16 22:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biolinker

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
289363400: 金币+1, ★有帮助, 谢谢！ 2014-07-17 11:59:04
那您有没有找另外一个Marker进行比对？还有电泳的时间和电压有没有考虑？
赞一下 回复此楼
2楼2014-07-17 09:26:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

289363400

铁杆木虫 (知名作家)

凌乱前进方向
引用回帖:
2楼: Originally posted by biolinker at 2014-07-17 09:26:19
那您有没有找另外一个Marker进行比对？还有电泳的时间和电压有没有考虑？

多谢！应该不是marker的问题，marker后来换过新的，还是不行。电泳电压在5-10V/cm之间，算不上高。电泳时间也不长，10-20min。都是这个样子。前一段时间还好好的，不知道现在为什么100b.p和200bp的条带就分不开了。
赞一下 回复此楼
3楼2014-07-17 11:58:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biolinker

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 289363400 at 2014-07-17 11:58:40
多谢！应该不是marker的问题，marker后来换过新的，还是不行。电泳电压在5-10V/cm之间，算不上高。电泳时间也不长，10-20min。都是这个样子。前一段时间还好好的，不知道现在为什么100b.p和200bp的条带就分不开了。...

那我就不是很清楚了，所有问题都考虑了，其他的真不知道哪里出问题了。不能帮到您了，不好意思。
赞一下 回复此楼
4楼2014-07-17 12:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
289363400: 金币+1, ★有帮助 2014-07-17 17:27:07
1、胶做的不错，排除胶的问题，缓冲液什么的其他的也肯定是没有问题了，电压应该影响不大
2、EB染色没有问题
3、问题可能出在marker上，有污染或者降解，不过问题也不大，因为条带还是看得见的
4、想跑开点的话就适当延长跑胶时间，个人感觉是你的胶跑的时间太短了
建议下次试试其他的marker，同时跑胶时间适当延长，希望对你有帮助
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
5楼2014-07-17 12:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
289363400: 金币+1, ★有帮助 2014-07-17 17:26:18
小分子量DNA容易扩散，当然是弥散的。
赞一下 回复此楼
6楼2014-07-17 16:26:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

289363400

铁杆木虫 (知名作家)

凌乱前进方向
引用回帖:
6楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-07-17 16:26:08
小分子量DNA容易扩散，当然是弥散的。

之前有段时间还好好的，不知道最近这是怎么了，前端就分不开了。
赞一下 回复此楼
7楼2014-07-17 17:26:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

289363400

铁杆木虫 (知名作家)

凌乱前进方向
引用回帖:
5楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-07-17 12:17:59
1、胶做的不错，排除胶的问题，缓冲液什么的其他的也肯定是没有问题了，电压应该影响不大
2、EB染色没有问题
3、问题可能出在marker上，有污染或者降解，不过问题也不大，因为条带还是看得见的
4、想跑开点的话就 ...

我试过长时间跑胶，结果是前端弥散更为严重。或许真的是marker的问题了。
赞一下 回复此楼
8楼2014-07-17 17:31:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

皇猪

木虫 (正式写手)
marker加多少微升呀，适当加大marker剂量试试！！！！
赞一下 回复此楼
没有梦想，那跟咸鱼有什么分别
9楼2014-07-18 08:20:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Agarose胶浓度是多少？用1.5%的胶试试看。
赞一下 回复此楼
10楼2014-07-18 08:31:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 289363400 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +4 kulium 2026-08-21 5/250 2026-08-21 17:45 by Equinoxhua
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 10/500 2026-08-21 17:32 by chengyan1220
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭