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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR前处理提取DNA的方法，可以反复冻融吗
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hmn22_33

银虫 (小有名气)

[求助] PCR前处理提取DNA的方法，可以反复冻融吗

PCR前处理提取DNA的方法，可以反复冻融吗？有没有这方面的文献，现在写论文，没有找到这样的文献，只是听别人说这样做可以，所以试验中直接这么做的，这样写上可以吗
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1楼 2013-08-10 10:31:14
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-10 14:26:50
hmn22_33: 金币+10, ★有帮助 2013-08-13 10:00:59
反复冻融是为了破碎细胞。PCR对gDNA的完整性要求不是特别高，所以可以这么做。
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2楼2013-08-10 12:52:31
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bullfrog325

木虫 (正式写手)
没有问题
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3楼2013-08-10 19:40:49
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hmn22_33

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-10 12:52:31
反复冻融是为了破碎细胞。PCR对gDNA的完整性要求不是特别高，所以可以这么做。

那我做菌种鉴定 ，不提前DNA，直接通过这步破碎细胞，然后PCR，对结果影响大吗？实验结果是否可靠
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4楼2013-08-11 21:20:53
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莓林塔

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2013-08-13 16:35:20
没有问题，直接拿菌体PCR就OK，如果是阴性菌，连破壁都不需要~~
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5楼2013-08-11 21:24:14
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by hmn22_33 at 2013-08-11 21:20:53
那我做菌种鉴定 ，不提前DNA，直接通过这步破碎细胞，然后PCR，对结果影响大吗？实验结果是否可靠...

PCR用的DNA不用特别完整，即使再小心也会有一定程度的随机断裂。你做的是鉴定，不是定量，所以没有太大关系。
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6楼2013-08-12 10:32:23
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hmn22_33

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-12 10:32:23
PCR用的DNA不用特别完整，即使再小心也会有一定程度的随机断裂。你做的是鉴定，不是定量，所以没有太大关系。...

好的，谢谢，但是我没有看到类似的文章
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7楼2013-08-13 09:59:25
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hmn22_33

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-08-10 19:40:49
没有问题

谢谢
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8楼2013-08-13 10:00:31
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hmn22_33

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 莓林塔 at 2013-08-11 21:24:14
没有问题，直接拿菌体PCR就OK，如果是阴性菌，连破壁都不需要~~

我的是酵母菌，应该不好破壁吧
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9楼2013-08-13 10:01:20
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hmn22_33

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-08-10 19:40:49
没有问题

谢谢
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10楼2013-08-13 10:01:31
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