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guoxingjun2008金虫 (正式写手)
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[求助]
DNA如何定量？ 已有2人参与
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对分子生物学了解不多，属于菜鸟，想咨询一下怎么样才能准确检测DNA的量，不是定性。 如果是提取的DNA被活性炭吸附了，如何检测被活性炭吸附到表面的DNA的量呢？ 希望各位专家多提指导意见呀，谢谢！ |
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guoxingjun2008
金虫 (正式写手)
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4楼2015-04-15 16:45:39
【答案】应助回帖
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可以用定磷法 磷的测定方法很多，Fiske-Subbarow定磷法是一经典的但至今仍被经常采用的方法，它具有灵敏、简便的特点。各种含磷有机物经硫酸或过氯酸水解，使有机磷消化成为无机磷。无机磷在酸性条件下，与钼酸盐（常用钼酸铵或钼酸钠）反应生成磷钼酸盐络合物。用还原剂处理，磷钼酸盐络合物被还原生成钼蓝，在660nm处有最大光吸收峰。在一定浓度范围内，颜色的深浅与磷含量成正比关系。因此可应用分光光度法进行磷的定量测定核酸是一类含磷化合物，其分子含有一定比例的磷，一般纯的RNA及其核苷酸含磷质量分数为9.0%；DNA及其核苷酸含磷质量分数为9.2%，即每100g核酸含有9.0～9.2g磷，也就是核酸量是含磷量的11倍左右，故测得磷的量，即可求得核酸量。这就是定磷法的理论依据，磷的定量测定是测定核酸含量常用手段之一。 |
2楼2015-04-09 12:52:58
3楼2015-04-09 16:41:06