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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » hplc液相检测压力总是不稳定，怎么办？见图
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KOMIU

新虫 (初入文坛)

[求助] hplc液相检测压力总是不稳定，怎么办？见图 已有12人参与

本人小白一只，在用安捷伦高效液相色谱做唾液酸的检测。无奈做了好几次了，压力总是不稳定。请学霸师姐帮忙看了，进样前压力一直稳定的，在100bar左右。进样检测后，压力就不稳定了。各位大神大牛求帮忙看看是什么原因？ 在线等～我有什么没说到的尽管问，谢谢！

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1楼 2015-03-31 14:50:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
切换一下六通阀看看，进样前流动相走旁路，不经过六通阀，进样后，流动相经过六通阀，从流路上来说这是唯一的区别，因此怀疑是否是六通阀出了问题，建议，切换至旁路看看。
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归零
6楼2015-03-31 19:07:36
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上图看看，最常见的可能单向阀盐析造成磨损，密封不行了
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悲催的研发！
3楼2015-03-31 17:13:25
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个压力图长的挺像单向阀损坏的样子···换个项目做做看，如果还这样换个单向阀吧
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铁甲依然在
5楼2015-03-31 18:09:42
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xiaofei_lu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
排除法
用流动相做样品进去看看还波动吗？
换成不含盐的流动相进样看看还波动吗？
单向阀超声清洗试试。
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欢迎关注我的微信公众号AnalyticalChem专业的分析化学、色谱质谱知识平台
14楼2015-04-01 05:19:01
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w9412

新虫 (正式写手)
这样看的话，应该是你流动相的问题。

压力波动是稍微有点大了，如果检测结果挺好的，就不用纠结这个了
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液相，分析纯化，多肽蛋白
17楼2015-04-01 12:38:38
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vical

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.可以把单向阀拆下来清洗一下，因为可能上一次用的人把单向阀弄堵了
2.流动相更换完以后，一定要先大流速灌泵冲洗。
2.样品最好多加一点，少量样品的话最好换那种带尖底的样品瓶，平底样品瓶如果进样针稍微弯了点，可能就吸不到样品。
3.考虑做一个泵的渗漏测试，一般控制台的维护模式里都有这个功能，如果有渗漏的话，考虑换密封圈
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24楼2015-04-06 17:09:16
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普通回帖

KOMIU

新虫 (初入文坛)
小白表示不会用手机发图，等下用电脑再上图！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2015-03-31 14:51:51
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KOMIU

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by e_liang369 at 2015-03-31 17:13:25
上图看看，最常见的可能单向阀盐析造成磨损，密封不行了

我表示在电脑上也找不到传图片的地方T.T，不过在高级回复里面看到了~就直接回你啦~~图挺大的，可以点大图细看~~  进样前压力稳定在100bar左右，波动小于1bar，进样后压力就开始慢慢向下掉。图是进的第四个样的，一个样走60min，图中压力大概在80-90bar中间来回振荡，波动有5bar了！  学霸师姐做液相的时候就没有这个问题，压力从头到尾一直是稳定的。   麻烦你看一下是怎么回事，我该肿么办呢？~~谢谢啦
hplc液相检测压力总是不稳定，怎么办？见图
IMG_9650.JPG
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4楼2015-03-31 17:49:42
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
学霸师姐用的条件和你用的条件有什么区别吗？
如果是用有机相和缓冲盐溶液作流动相要先混匀，分在两个通道在仪器里混匀的时候可能会析出盐造成压力不稳定。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
7楼2015-03-31 19:47:02
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KOMIU

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 赈早见琥珀主 at 2015-03-31 18:09:42
这个压力图长的挺像单向阀损坏的样子···换个项目做做看，如果还这样换个单向阀吧

我用的那台液相别人也在用，都没有问题，只有我做的时候压力不稳。如果是阀的问题，那么应该大家都有问题的。  请问下会不会是别的什么原因呢？~    我的流动相是1%四氢呋喃（含0.2%磷酸）：乙腈=92:8， 色谱柱是ACE 5 AQ C18柱，250*4.6mm，5um。
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8楼2015-03-31 19:47:11
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KOMIU

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by archbishop at 2015-03-31 19:47:02
学霸师姐用的条件和你用的条件有什么区别吗？
如果是用有机相和缓冲盐溶液作流动相要先混匀，分在两个通道在仪器里混匀的时候可能会析出盐造成压力不稳定。

学霸师姐和我做的完全不一样~ 她用的凝胶柱，用液相做分离的。 我用的那台安捷伦HPLC有好多人用，大家轮着用的；学霸师姐用的比较多，平常仪器出问题了也是她修的。可是最近师姐修好后，只有我用的时候有问题，也是醉了。  我用的流动相是1%四氢呋喃（含0.2%磷酸）：乙腈=92:8，直接在一个瓶子里配好500ml，超声20min后，直接B泵进的。
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9楼2015-03-31 19:53:50
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
9楼: Originally posted by KOMIU at 2015-03-31 19:53:50
学霸师姐和我做的完全不一样~ 她用的凝胶柱，用液相做分离的。 我用的那台安捷伦HPLC有好多人用，大家轮着用的；学霸师姐用的比较多，平常仪器出问题了也是她修的。可是最近师姐修好后，只有我用的时候有问题，也是 ...

这种大家轮着用的仪器的确容易出问题。你可以按照上面各位说的排查一下。

你的学霸师姐好厉害！
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
10楼2015-03-31 19:56:53
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