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三与七之间

铁虫 (小有名气)

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[求助] PCR体系的配制已有2人参与

小妹想弱弱的问一句，PCR体系的配制标准究竟是什么啊？怎么同是配制20ul的体系，成分的配比都不一样呢？？？

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1楼 2015-03-14 20:09:11

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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
三与七之间: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2015-05-05 20:15:10

同是配制20ul的体系，成分的配比不一样
因为你扩增的模板引物酶等他们的浓度不一样啊，所以加入量当然不一样。举例
比如你的扩增要求的模板是3ug。如果你的模板浓度是1ug/ul,，那你就加入3ul就对了，但是如果你的模板浓度是0.5ug/ul,那你就要加入6ul，加入的体积是不同的，但是量却是相同的，就是这个道理啊
在比如热启动酶20ul体系你只需要加入1ul就够了，而普通的Taq酶你要加入2ul，这不是成分配比不一样，而是热启动Taq酶的性能高于普通的Taq酶