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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于拟南芥转基因的一些问题
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 关于拟南芥转基因的一些问题 已有4人参与

各位大神：我现在关于拟南芥转基因中的农杆菌浸花法有一些疑问，我现在按照5%的蔗糖+0.005%的silwetL-77的侵染液配方总是转不出来，是我的配方有问题吗？
还有一个就是，拟南芥侵染完后避光保湿是必须的吗？是因为啥呢？
最后一个问题是为何我拟南芥的花在侵染完后容易死，长不出荚来呢？
求大神解答
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1楼 2015-03-12 10:29:07
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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lwk5716: 金币+6, ★★★很有帮助 2015-03-13 09:13:59
拟南芥的花在侵染完后容易死，长不出荚来是不是因为农杆菌毒性太强、侵染时间过长、农杆菌OD值太高引起的？
拟南芥侵染完后避光保湿是书上步骤里的。原因应该是为了让侵染的叶片有一个缓冲生长的作用。毕竟生病了一场，需要好好休养才能继续生长。
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2楼2015-03-12 15:49:47
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匿名

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lwk5716: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-03-13 13:55:48
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4楼2015-03-13 12:39:49
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2015-03-12 15:49:47
拟南芥的花在侵染完后容易死，长不出荚来是不是因为农杆菌毒性太强、侵染时间过长、农杆菌OD值太高引起的？
拟南芥侵染完后避光保湿是书上步骤里的。原因应该是为了让侵染的叶片有一个缓冲生长的作用。毕竟生病了一 ...

我的浸染时间也就是不到1分钟，30秒左右，OD值在0.6-1.0左右，我怀疑是不是Silwet的原因？
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3楼2015-03-13 09:15:35
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 立林258369 at 2015-03-13 12:39:49
楼主缺少重要的东西，乙酰丁香酮，我一般还会加6-ba，转染后，保湿，避光，避高温24小时，生长15天后，再转一次。上次转出来50多株抗性苗，大部分都是的

谢谢您的回答，我看到有些配方上没写乙酰丁香酮所以我就没加，现在最大的问题是花侵染完后就容易死，也可能是我没保湿的原因吧。
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5楼2015-03-13 13:55:50
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匿名

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6楼2015-03-13 14:17:58
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 立林258369 at 2015-03-13 14:17:58
嗯，这个是一个原因，还有就是暗处放置后，植物顶端不要太靠近灯管，转化液浓度高，容易缺水
...

谢谢你的回答！
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7楼2015-03-13 14:44:26
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2015-03-12 15:49:47
拟南芥的花在侵染完后容易死，长不出荚来是不是因为农杆菌毒性太强、侵染时间过长、农杆菌OD值太高引起的？
拟南芥侵染完后避光保湿是书上步骤里的。原因应该是为了让侵染的叶片有一个缓冲生长的作用。毕竟生病了一 ...

请问，农杆菌毒性太强是啥意思啊？
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8楼2015-03-14 08:42:43
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lwk5716 at 2015-03-14 08:42:43
请问，农杆菌毒性太强是啥意思啊？...

就是农杆菌的侵染力太强了，会把拟南芥整死的意思。

[ 发自小木虫客户端 ]
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9楼2015-03-14 10:51:03
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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2015-03-14 10:51:03
就是农杆菌的侵染力太强了，会把拟南芥整死的意思。
...

哦，明白了，那侵染力如何调整啊？
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10楼2015-03-14 13:09:04
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