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yindongxue

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求拟南芥种植的详细步骤已有6人参与

如题,求拟南芥培养基培养的详细步骤,越详细越好!谢谢!
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

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yindongxue(金币+1):谢谢参与
我种拟南芥,刚开始觉得挺难的,现在发现拟南芥生命力太顽强了。。。
等到晚些时候再把详细的过程传上去

[ Last edited by fungixx on 2010-5-14 at 16:03 ]
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-05-14 16:02:13
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rkrl001

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
yindongxue(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+5):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-14 21:08:50
一.拟南芥生长过程
拟南芥生长的适宜温度白天为22℃-24℃,夜温最好比日温低2℃,适宜的湿度为60-70%,生长期适宜的光强为150μmol·s-1·m-2.拟南芥在日照长于12小时下才会开花,一般拟南芥生长室的日照长度定于14-16h为佳。
1.准备发苗培养基:
1/2 MS,Sucrose:10g/L,pH5.7,agar:0.7-0.8%.灭菌后,在超净台上分装入培养皿.
2.种子消毒有两种方法:
一种是湿法NaClO水溶液消毒:种子放在1.5ml试管中, 加入1ml10%NaClo,混匀,消毒5min,用无菌水洗5次以上(用移液枪吸),湿法消毒后的种子要马上播;另一种是干法8%NaClO 酒精溶液,此时需用95%的酒精来配制8%NaClO 酒精溶液。在8%NaClO 酒精溶液中消毒6-8min。然后用无水酒精洗种子5次以上,吸干无水酒精后,在超净工作台上吹干透后再密闭保存。
3.播种:
对湿法NaClO水溶液消毒种子用移液枪将种子吸到培养皿上,可多加些水,将种子铺均匀(不要太密,太密根缠在一起不好移苗),用移液枪吸干水,在超净台上让培养皿干了;对干法消毒的种子,用无菌牙签将种子点播到培养基上。用Parafilm密封盖子后,请用牙签或镊子在上下两处各打4个小孔以通气。最好是在每皿<30株这样的密度下,让其生长两周后再移苗.
4.移苗及后续管理:
如果培养基质用花泥,将花泥装入花盆,将花盆放入有水的塑料周转框中,框中的水就会通过花盆底部的孔渗上来,待花盆中的基质湿透后即可移苗.小心轻轻用镊子从培养皿中连根取出小苗,把苗种入花泥中.移苗结束后,用保鲜膜覆盖1-2天后揭膜,如果苗很弱,则在此基础上还需多覆盖1天.在花泥中种植时,苗期不需要添加营养液,开始抽苔时请及时添加营养液,一般需要添加2次,每次加入1升拟南芥营养液,2次添加最好间隔一段生长时期(7-10天),由于花泥有较好的吸附缓释能力,对间隔时间长短没有严格要求。如果盆栽密度较大或框中花盆数量较多则需要多加一次营养液。对于花泥种植来说,不要在塑料周转框中始终保持水层,一次吸足水分后,可以隔4-6天后再加水让其吸足水分,在开始收籽期,不再需要过多的水分,可保持塑料周转框干燥,此时每隔7-10天加一次水即可.
5.收籽:
在种荚变黄,变干时可以收籽.将种子抖落在纸上,用金属滤网过一下以除去杂质,将种子装入写了标记的小纸袋中,放于干燥的环境中让种子进一步干燥后,封存于1.5ml试管中,切记越干越好,长期保存的种子必需要干燥保存到4℃。

[ Last edited by rkrl001 on 2010-5-14 at 17:38 ]
5楼2010-05-14 17:35:48
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plantaqp

金虫 (正式写手)


yindongxue(金币+1):谢谢参与
直接撒到湿润的土质培养基里不就完了,我们都是这么做的。萌发几天后去掉一些过多的。
6楼2010-05-15 05:09:04
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Atalpha

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
yindongxue(金币+1):谢谢参与
plantaqp(金币+2):欢迎交流 2010-05-16 02:15:22
请参考Arabidopsis Protocols (http://www.springerprotocols.com/BookToc/doi/10.1385/0896033910),如没有权限下载,可以求助或参考拟南芥-实验室手册这本书,下载地址:http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2055128
7楼2010-05-16 00:27:35
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starseacow

专家顾问 (职业作家)


yindongxue(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
8楼: Originally posted by zaofa1108 at 2015-10-15 22:22:47
我10-1播种,现在已经长出小苗了,请问高手什么情况下可以移苗种植?
...

两片子叶,两片真叶呈十字形,大小相差不多
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
9楼2015-10-15 22:58:20
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普通回帖

cqyniu

金虫 (小有名气)


yindongxue(金币+1):谢谢参与
我只种过花生,还没有种过拟南芥哦。拟南芥种子太小了,不太好弄
2楼2010-05-14 15:06:14
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lingn

木虫 (正式写手)


yindongxue(金币+1):谢谢参与
用次氯酸钠把种子灭一下菌,然后点或撒到培养基上。
4楼2010-05-14 16:14:28
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zaofa1108

新虫 (小有名气)


yindongxue(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
5楼: Originally posted by rkrl001 at 2010-05-14 17:35:48
一.拟南芥生长过程
拟南芥生长的适宜温度白天为22℃-24℃,夜温最好比日温低2℃,适宜的湿度为60-70%,生长期适宜的光强为150μmol·s-1·m-2.拟南芥在日照长于12小时下才会开花,一般拟南芥生长室的日照长度定于14-1 ...

我10-1播种,现在已经长出小苗了,请问高手什么情况下可以移苗种植?

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8楼2015-10-15 22:22:47
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yindongxue(金币+1): 谢谢参与


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10楼2015-10-22 13:05:50
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