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yindongxue铜虫 (初入文坛)
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【求助/交流】求拟南芥种植的详细步骤 已有6人参与
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| 如题，求拟南芥培养基培养的详细步骤，越详细越好！谢谢！ |
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fungixx
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3楼2010-05-14 16:02:13
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yindongxue(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+5):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-14 21:08:50
yindongxue(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+5):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-14 21:08:50
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一．拟南芥生长过程 拟南芥生长的适宜温度白天为22℃-24℃,夜温最好比日温低2℃,适宜的湿度为60-70%,生长期适宜的光强为150μmol·s-1·m-2.拟南芥在日照长于12小时下才会开花,一般拟南芥生长室的日照长度定于14-16h为佳。 1．准备发苗培养基: 1/2 MS,Sucrose:10g/L,pH5.7,agar:0.7-0.8%.灭菌后,在超净台上分装入培养皿. 2．种子消毒有两种方法： 一种是湿法NaClO水溶液消毒:种子放在1.5ml试管中, 加入1ml10%NaClo,混匀,消毒5min,用无菌水洗5次以上(用移液枪吸)，湿法消毒后的种子要马上播；另一种是干法8%NaClO 酒精溶液，此时需用95%的酒精来配制8%NaClO 酒精溶液。在8%NaClO 酒精溶液中消毒6-8min。然后用无水酒精洗种子5次以上，吸干无水酒精后，在超净工作台上吹干透后再密闭保存。 3．播种： 对湿法NaClO水溶液消毒种子用移液枪将种子吸到培养皿上,可多加些水,将种子铺均匀(不要太密,太密根缠在一起不好移苗),用移液枪吸干水,在超净台上让培养皿干了；对干法消毒的种子，用无菌牙签将种子点播到培养基上。用Parafilm密封盖子后,请用牙签或镊子在上下两处各打4个小孔以通气。最好是在每皿<30株这样的密度下,让其生长两周后再移苗. 4.移苗及后续管理: 如果培养基质用花泥，将花泥装入花盆,将花盆放入有水的塑料周转框中,框中的水就会通过花盆底部的孔渗上来,待花盆中的基质湿透后即可移苗.小心轻轻用镊子从培养皿中连根取出小苗,把苗种入花泥中.移苗结束后,用保鲜膜覆盖1-2天后揭膜，如果苗很弱，则在此基础上还需多覆盖1天.在花泥中种植时，苗期不需要添加营养液，开始抽苔时请及时添加营养液，一般需要添加2次，每次加入1升拟南芥营养液，2次添加最好间隔一段生长时期（7-10天），由于花泥有较好的吸附缓释能力，对间隔时间长短没有严格要求。如果盆栽密度较大或框中花盆数量较多则需要多加一次营养液。对于花泥种植来说，不要在塑料周转框中始终保持水层,一次吸足水分后，可以隔4-6天后再加水让其吸足水分，在开始收籽期,不再需要过多的水分,可保持塑料周转框干燥,此时每隔7-10天加一次水即可. 5．收籽: 在种荚变黄,变干时可以收籽.将种子抖落在纸上,用金属滤网过一下以除去杂质,将种子装入写了标记的小纸袋中,放于干燥的环境中让种子进一步干燥后,封存于1.5ml试管中，切记越干越好，长期保存的种子必需要干燥保存到4℃。 [ Last edited by rkrl001 on 2010-5-14 at 17:38 ] |
5楼2010-05-14 17:35:48
6楼2010-05-15 05:09:04
Atalpha
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yindongxue(金币+1):谢谢参与
plantaqp(金币+2):欢迎交流 2010-05-16 02:15:22
yindongxue(金币+1):谢谢参与
plantaqp(金币+2):欢迎交流 2010-05-16 02:15:22
| 请参考Arabidopsis Protocols （http://www.springerprotocols.com/BookToc/doi/10.1385/0896033910），如没有权限下载，可以求助或参考拟南芥-实验室手册这本书，下载地址：http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2055128 |
7楼2010-05-16 00:27:35
starseacow
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8楼2015-10-15 22:22:47
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yindongxue(金币+1): 谢谢参与
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10楼2015-10-22 13:05:50
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