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qian850113

木虫 (初入文坛)

[求助] 长片段PCR点样孔亮带,目的条带无法扩增

已建立好的长片段PCR方法突然无法扩增目的条带。
酶用的Takara的Prime HS Taq。退货温度65℃,产物为5Kb和3Kb。多重PCR体系两对引物同时扩增
正常检测图如下:
长片段PCR点样孔亮带,目的条带无法扩增
1.JPG

目前图片如下:
长片段PCR点样孔亮带,目的条带无法扩增-1
2.JPG

PCR反应条件不变,降低退火温度,增加或减少模版浓度均没有改善。重提DNA模版也不行。
请问,什么原因可能导致上述情况。
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qian
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