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jingxuegood

新虫 (正式写手)

[求助] 求助土壤酸性磷酸酶活性测定的详细方法~~~已有4人参与

试验需要测定土壤酸性磷酸酶活性,想用对硝基苯磷酸二钠比色法,但查到的方法不够详细。有的说要每个样品都要做空白对照,有点没有提及这点;关于标准曲线的测定时加入的试剂也不尽相同,现在很是混乱。望做过相关试验的人士给予详细方法和相关指点,非常感谢!!!
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jingxuegood

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by macjr at 2015-01-27 09:22:01
不是空白对照,是无基质对照。。每个土样都必须,其实网络上的方法都一样,酸性磷酸酶最后的反应液反应条件是在碱性的环境下的

你好,感谢回复。我想问一下,你说的“酸性磷酸酶最后的反应液反应条件是在碱性环境下的”是什么意思呀?缓冲液pH是多少呀?用PNPP做基质,醋酸-醋酸钠做缓冲液时,测定标准曲线都需要加入什么试剂呢?有点混乱,能不能给我发一份详细的测定方法呢?非常感谢~~~

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-01-27 20:25:59
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jingxuegood

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by macjr at 2015-01-28 09:12:37
土壤磷酸酶(酸性)
(一)试剂
1. pH5醋酸盐缓冲液:
A:0.2mol/L 醋酸溶液(11.55ml稀释至1000ml)
B:0.2mol/L醋酸钠溶液 A液14.8ml+B液35.2ml稀释至100ml
2. 0.5%磷酸苯二钠:pH5醋酸缓冲液
3. 氯代二溴对 ...

收到,非常感谢!只是我想用PNPP(对硝基苯磷酸二钠)做基质~~~
5楼2015-01-29 10:42:55
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jingxuegood

新虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by macjr at 2015-01-28 09:12:37
土壤磷酸酶(酸性)
(一)试剂
1. pH5醋酸盐缓冲液:
A:0.2mol/L 醋酸溶液(11.55ml稀释至1000ml)
B:0.2mol/L醋酸钠溶液 A液14.8ml+B液35.2ml稀释至100ml
2. 0.5%磷酸苯二钠:pH5醋酸缓冲液
3. 氯代二溴对 ...

说你的回帖“不是应助回帖,您不能对此进行金币奖励”,所以以送红花的形式答谢吧,~~~
6楼2015-01-29 10:45:08
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