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imchunfan

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于土壤中过氧化氢酶活性的测定 已有4人参与

土壤中过氧化氢酶活的测定方法:称取3.00g新鲜土样于150ml三角瓶,加入40ml蒸馏水和5ml 0.3% H2O2,重复三次,封口膜封口。同时设置对照,不加土样。将三角瓶置于120次/min,30℃恒温振荡30min。立即加入10ml 3N H2SO4终止反应,用中速定性滤纸过滤。吸取25ml 滤液,用0.01N KMnO4滴定至微红色,样品一滴一滴滴30s。
关于这个实验我有一些问题:
1、我空白的滴定量就比较低,只有5点几ml,土壤样品的滴定量就更低了,几滴就会变成粉红色了,我想问下,这种情况是正常的吗?如果是这样的话,误差肯定很大呀,是否要调整一下 H2O2或者KMnO4的浓度呢?为什么不提高 H2O2的浓度或者降低KMnO4的浓度呢?
2、滴定过程三角瓶中液体变为粉红色,但是隔一段时间就会褪色,这种情况是正常的嘛?感觉这种情况下也会增加误差的呀!
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luo88

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你好!试验方法不是死的,要灵活运用,针对自己的试验进行小改动也是可以的(前提是必须合理)。第一个问题,鉴于样品滴定时,应该是降低高锰酸钾的浓度,进行滴定,30s不褪色就认为到达终点,记录消耗量。
第二个问题,高猛酸钾本身就是一个强氧化剂,易变,要低温储存,必要时现配现用。
仅供参考,希望有所帮助。
3楼2014-10-24 09:30:01
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a2004054

金虫 (知名作家)

快乐家族-安

优秀版主

【答案】应助回帖

楼上说的对,可以降低高锰酸钾浓度,过氧化氢浓度则不可以随意更改,以免影响试验反应进程
随遇而安
5楼2014-10-26 12:04:45
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普通回帖

imchunfan

新虫 (初入文坛)

有没有人可以解答一下呀??
2楼2014-10-23 16:25:56
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imchunfan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by luo88 at 2014-10-24 09:30:01
你好!试验方法不是死的,要灵活运用,针对自己的试验进行小改动也是可以的(前提是必须合理)。第一个问题,鉴于样品滴定时,应该是降低高锰酸钾的浓度,进行滴定,30s不褪色就认为到达终点,记录消耗量。
第二个 ...

就是说高锰酸钾的浓度是可以降低后再进行滴定的啦,谢谢你啦
4楼2014-10-24 18:27:58
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macjr

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by imchunfan at 2014-10-24 18:27:58
就是说高锰酸钾的浓度是可以降低后再进行滴定的啦,谢谢你啦...

同时,如果可以的话选择用吸光度的方法,《紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性》可以参照这个文献,但是对于文献中加入硫酸铝钾,然后在过滤,基本上没有用,而且过滤时间长;我做的时候是选择了离心2分钟,然后迅速过滤至硫酸溶液中,然后在稀释,进行测定吸光度的。
6楼2014-10-27 08:16:18
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shanshan柳

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by macjr at 2014-10-27 08:16:18
同时,如果可以的话选择用吸光度的方法,《紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性》可以参照这个文献,但是对于文献中加入硫酸铝钾,然后在过滤,基本上没有用,而且过滤时间长;我做的时候是选择了离心2分钟,然后 ...

请问一下文献中的那个公式是不是有问题
7楼2015-04-15 17:17:35
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shanshan柳

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by macjr at 2014-10-27 08:16:18
同时,如果可以的话选择用吸光度的方法,《紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性》可以参照这个文献,但是对于文献中加入硫酸铝钾,然后在过滤,基本上没有用,而且过滤时间长;我做的时候是选择了离心2分钟,然后 ...

不过滤会不会对测试结果有影响,初做酶活实验,求大神帮助
8楼2015-04-15 17:24:39
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macjr

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by shanshan柳 at 2015-04-15 17:17:35
请问一下文献中的那个公式是不是有问题...

没有问题的。。我一开始也怀疑的。但是确实没错
9楼2015-04-16 07:40:00
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macjr

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by shanshan柳 at 2015-04-15 17:24:39
不过滤会不会对测试结果有影响,初做酶活实验,求大神帮助...

当然要过滤啊。过滤了才能终止反应。
10楼2015-04-16 07:40:51
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