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flypigging木虫 (正式写手)
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【求助】土壤脱氢酶活性 已有5人参与
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| 最近打算测定土壤脱氢酶的活性，看了几种方法各不相同，而且有些试剂配置方法也不一样，有虫友测过的话，给点建议 |
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xiaowuhehe
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
三个小石子(金币+2):辛苦了！ 2010-05-11 21:00:12
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我这有一个方法，不过我没测过 土壤脱氢酶活性测定 测定步骤 1 称取4克鲜土于50ml三角瓶中，加入4ml（0.5%TTC+0.5%葡萄糖）-Tris缓冲溶液（pH7.6）,(2ml 1%TTC-Tris缓冲溶液，2ml 1%葡萄糖)，置37℃暗室培养24hr。 2 取出后用少量甲醇提取后过滤，再用50ml容量瓶或比色管定容。 3 滤液马上用485nm波长下分光光度计测定。 pH7.6 Tris缓冲液的配制： A：0.2M三-（羟甲基）-氨基甲烷溶液（1000 ml含24.23克） B：0.2M HCl 100 ml A+76.8ml B,加水稀释至400 ml，准确调节pH为7.6。 TBF标准曲线的制备：准确称取10mg TPF溶于250 ml甲醇中，得到40 mg/L的母液。从中吸取0，1，2，3，4，5 ml于50ml容量瓶中，用甲醇定容，得到0，40，80，120，160，200ug TPF的标准曲线。 参考文献 Casida LC Jr, Klein DA, Santoro T(1964) Soil dehydrogenase activity. Soil Science 98, 371-376. H.Y.Chu, J.G.Zhu, Z.B.Xie, H.Y.Zhang, Z.H.Cao and Z.G.Li(2003) Effects of lanthanum on dehydrogenase activity and carbon dioxide evolution in a Haplic Acrisol. Australian Journal of Soil Research 41, 731-739. H.Y.Chu, |
2楼2010-05-09 19:12:41
flypigging
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