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mirongsheng

木虫 (著名写手)

[交流] 纯化的HIs标签融合蛋白低温放置出现絮状沉淀,求解?

我的目的蛋白,连接到pET28a载体上,进行表达,表达量还挺高,可溶性表达,但是过His柱纯化以后,低温放置一段时间就出现絮状沉淀,即使是放在4度,更甭提-20度了。不知各位有没有好的方法解决这个问题,不胜感激!
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mi
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我是钢镚

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不知道样品中咪唑是否去除?可以加一点DTT,

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2楼2015-01-17 09:30:06
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阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)

路过,看了一下,帮顶~~~~~~~~~~~~~~~~~~
自强不息,厚德载物;独立精神,自由思想。
3楼2015-01-17 10:12:54
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mirongsheng

木虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我是钢镚 at 2015-01-17 09:30:06
不知道样品中咪唑是否去除?可以加一点DTT,

谢谢,试一下!

[ 发自小木虫客户端 ]
mi
4楼2015-01-18 07:39:14
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小小技术官

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
mirongsheng: 金币+5 2015-01-20 13:47:19
是咪唑的原因,置换成pbs就好了

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生活是一面镜子,要笑着面对!
5楼2015-01-19 10:52:55
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mirongsheng

木虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小小技术官 at 2015-01-19 10:52:55
是咪唑的原因,置换成pbs就好了

谢谢!试一下!
mi
6楼2015-01-19 12:03:34
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7楼2015-01-19 12:26:22
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xiaochong8693

木虫之王 (文坛精英)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
good luck!
blessing~~~~~~~~~~~~~
8楼2015-01-19 12:28:39
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enzyme_001

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
mirongsheng: 金币+5 2015-01-20 13:47:42
将buffer置换了,换成蛋白存储buffer就可以

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9楼2015-01-19 16:39:48
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mirongsheng

木虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by enzyme_001 at 2015-01-19 16:39:48
将buffer置换了,换成蛋白存储buffer就可以

谢谢!不知如何置换,是透析还是蛋白冻干以后加PBS溶解?
mi
10楼2015-01-20 08:41:23
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