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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

blessing
蓝精灵
11楼2015-01-20 09:06:20
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liuyuchang06

至尊木虫 (文坛精英)

博士

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
mirongsheng: 金币+5 2015-01-20 13:53:24
很可能是蛋白本身的性质就不稳定
12楼2015-01-20 09:06:31
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九字江山

银虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
mirongsheng: 金币+5 2015-01-20 13:48:10
你这蛋白放了多久啊。。。一般将目的蛋白提取出来,然后冻干保存或者-70度保存会比较好,蛋白冷藏很容易变性。建议先取一点样品,离心后上清沉淀(用buffer洗一下)分别电泳,确定一下沉淀是否是目的蛋白。将洗脱后的样品,最好透析到下一步要用的buffer里,浓缩后(蛋白浓度低易变性),再用0.22um的滤膜除菌后保存。
13楼2015-01-20 10:36:20
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探花花

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
mirongsheng: 金币+5 2015-01-20 13:48:24
对  有可能是咪唑的影响  如果是咪唑的话 就得透析   也有可能是蛋白含量高 过饱和 出现沉淀了
相信什么才会得到什么
14楼2015-01-20 10:43:11
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mirongsheng

木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 九字江山 at 2015-01-20 10:36:20
你这蛋白放了多久啊。。。一般将目的蛋白提取出来,然后冻干保存或者-70度保存会比较好,蛋白冷藏很容易变性。建议先取一点样品,离心后上清沉淀(用buffer洗一下)分别电泳,确定一下沉淀是否是目的蛋白。将洗脱后 ...

纯化后是打算免疫用的,但是过夜保存就会出现沉淀,再测浓度,显著降低,就没办法用了,不是要长期保存的
mi
15楼2015-01-20 13:46:19
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mirongsheng

木虫 (著名写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 探花花 at 2015-01-20 10:43:11
对  有可能是咪唑的影响  如果是咪唑的话 就得透析   也有可能是蛋白含量高 过饱和 出现沉淀了

谢谢!
mi
16楼2015-01-20 13:51:56
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mirongsheng

木虫 (著名写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by liuyuchang06 at 2015-01-20 09:06:31
很可能是蛋白本身的性质就不稳定

如果是蛋白本身的问题,有没有好的建议,我的蛋白是酶类
mi
17楼2015-01-20 13:53:15
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小小技术官

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by mirongsheng at 2015-01-20 08:41:23
谢谢!不知如何置换,是透析还是蛋白冻干以后加PBS溶解?...

用超滤管,或者过一遍分子筛就可以了
生活是一面镜子,要笑着面对!
18楼2015-01-20 14:30:53
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mirongsheng

木虫 (著名写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 小小技术官 at 2015-01-20 14:30:53
用超滤管,或者过一遍分子筛就可以了...

谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
mi
19楼2015-01-20 22:55:50
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xiaochong8693

木虫之王 (文坛精英)

good luck!
blessing~~~~~~~~~~~~~
祝福楼主!
20楼2015-01-20 23:32:01
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