应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 纯化的HIs标签融合蛋白低温放置出现絮状沉淀，求解？
242/3返回列表上一页123下一页
查看: 2799  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士
blessing
回复此楼
蓝精灵
11楼2015-01-20 09:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuchang06

至尊木虫 (文坛精英)

博士
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
mirongsheng: 金币+5 2015-01-20 13:53:24
很可能是蛋白本身的性质就不稳定
赞一下 回复此楼
12楼2015-01-20 09:06:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

九字江山

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
mirongsheng: 金币+5 2015-01-20 13:48:10
你这蛋白放了多久啊。。。一般将目的蛋白提取出来，然后冻干保存或者-70度保存会比较好，蛋白冷藏很容易变性。建议先取一点样品，离心后上清沉淀（用buffer洗一下）分别电泳，确定一下沉淀是否是目的蛋白。将洗脱后的样品，最好透析到下一步要用的buffer里，浓缩后（蛋白浓度低易变性），再用0.22um的滤膜除菌后保存。
赞一下 回复此楼
13楼2015-01-20 10:36:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

探花花

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
mirongsheng: 金币+5 2015-01-20 13:48:24
对  有可能是咪唑的影响  如果是咪唑的话 就得透析   也有可能是蛋白含量高 过饱和 出现沉淀了
赞一下 回复此楼
相信什么才会得到什么
14楼2015-01-20 10:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirongsheng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 九字江山 at 2015-01-20 10:36:20
你这蛋白放了多久啊。。。一般将目的蛋白提取出来，然后冻干保存或者-70度保存会比较好，蛋白冷藏很容易变性。建议先取一点样品，离心后上清沉淀（用buffer洗一下）分别电泳，确定一下沉淀是否是目的蛋白。将洗脱后 ...

纯化后是打算免疫用的，但是过夜保存就会出现沉淀，再测浓度，显著降低，就没办法用了，不是要长期保存的
赞一下 回复此楼
mi
15楼2015-01-20 13:46:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirongsheng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 探花花 at 2015-01-20 10:43:11
对  有可能是咪唑的影响  如果是咪唑的话 就得透析   也有可能是蛋白含量高 过饱和 出现沉淀了

谢谢！
回复此楼
mi
16楼2015-01-20 13:51:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirongsheng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by liuyuchang06 at 2015-01-20 09:06:31
很可能是蛋白本身的性质就不稳定

如果是蛋白本身的问题，有没有好的建议，我的蛋白是酶类
赞一下 回复此楼
mi
17楼2015-01-20 13:53:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小技术官

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by mirongsheng at 2015-01-20 08:41:23
谢谢！不知如何置换，是透析还是蛋白冻干以后加PBS溶解？...

用超滤管，或者过一遍分子筛就可以了
赞一下 回复此楼
生活是一面镜子，要笑着面对！
18楼2015-01-20 14:30:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirongsheng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 小小技术官 at 2015-01-20 14:30:53
用超滤管，或者过一遍分子筛就可以了...

谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
mi
19楼2015-01-20 22:55:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaochong8693

木虫之王 (文坛精英)
good luck!
blessing~~~~~~~~~~~~~
祝福楼主！
赞一下 回复此楼
20楼2015-01-20 23:32:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mirongsheng 的主题更新
242/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-13 11:37 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:13 by Equinoxhua
[考博] 博士申请 +4 z_l_l_666 2026-11-06 4/200 2026-11-13 06:19 by wlf1982
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:31 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:41 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:30 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 09:52 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:46 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:41 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 5/250 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 7/350 2026-11-12 05:41 by 9fOTqj074tIg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-12 04:57 by 9fOTqj074tIg
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭