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mirongsheng

木虫 (著名写手)

[交流] 纯化的HIs标签融合蛋白低温放置出现絮状沉淀,求解?

我的目的蛋白,连接到pET28a载体上,进行表达,表达量还挺高,可溶性表达,但是过His柱纯化以后,低温放置一段时间就出现絮状沉淀,即使是放在4度,更甭提-20度了。不知各位有没有好的方法解决这个问题,不胜感激!
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mi
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mirongsheng

木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 九字江山 at 2015-01-20 10:36:20
你这蛋白放了多久啊。。。一般将目的蛋白提取出来,然后冻干保存或者-70度保存会比较好,蛋白冷藏很容易变性。建议先取一点样品,离心后上清沉淀(用buffer洗一下)分别电泳,确定一下沉淀是否是目的蛋白。将洗脱后 ...

纯化后是打算免疫用的,但是过夜保存就会出现沉淀,再测浓度,显著降低,就没办法用了,不是要长期保存的
mi
15楼2015-01-20 13:46:19
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我是钢镚

木虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不知道样品中咪唑是否去除?可以加一点DTT,

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-01-17 09:30:06
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阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)

路过,看了一下,帮顶~~~~~~~~~~~~~~~~~~
自强不息,厚德载物;独立精神,自由思想。
3楼2015-01-17 10:12:54
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mirongsheng

木虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我是钢镚 at 2015-01-17 09:30:06
不知道样品中咪唑是否去除?可以加一点DTT,

谢谢,试一下!

[ 发自小木虫客户端 ]
mi
4楼2015-01-18 07:39:14
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