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HPLC两个峰分不开,梯度洗脱已经是100的高纯水了
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小小小糖豆
银虫
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HPLC两个峰分不开,梯度洗脱已经是100的高纯水了
已有7人参与
液相条件:c18柱,流动相A:1%冰醋酸水;B:1%冰醋酸甲醇
图谱如图,1号峰初步认定为没食子酸,推测2、3号峰也为酚酸类,但此时流动相已经是100%的水了,怎么使2、3号峰能够分开。试过用纯水不用酸水跑,依旧没有分开,并且峰型不如酸水好
Screenshot_2015-01-15-09-02-26.png
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【求助】HPLC(Waters 600E)梯度洗脱进样时出现气泡(峰图产生大量负峰)
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1楼
2015-01-15 09:18:08
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药剂天下ing
新虫
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【答案】应助回帖
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建议1)请说明检测波长如何,1%的酸对色谱柱也是不利的,建议0.1~-0.5%为宜;2)换色谱柱,应换亲水材料的柱子,可以试试SB-Aq等
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9楼
2015-01-16 14:03:45
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klicking
至尊木虫
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专业: 药物分析
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明显已经分开了,只是中间的基线陡然升高,应该关注如何让基线回落到正常水平。建议贴上梯度条件!
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2楼
2015-01-15 10:09:11
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longyi706565
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基线抬高,很有可能物质2和3相互转化,可能是2或3在你所在的色谱系统中极不稳定,个人觉得还是做下LC/MS比较好。
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3楼
2015-01-15 13:17:41
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小小小糖豆
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2楼
:
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klicking
at 2015-01-15 10:09:11
明显已经分开了,只是中间的基线陡然升高,应该关注如何让基线回落到正常水平。建议贴上梯度条件!
梯度条件,A:1%冰醋酸水;B:1%冰醋酸甲醇
0min 0%B;
15min 5%B;
45min 10%B;
75min 15%B;
80min 30%B;
90min 50%B;
100min 5%B;
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4楼
2015-01-15 15:47:13
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