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choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

[求助] 只要是环状DNA就可以转化到细菌中吗 已有4人参与

如题,小弟新来的。小弟想连接后筛选出成环的DNA,想通过转化试试。不知道可行否?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2015-01-07 22:46:27
不知道捏问题是啥》
?
2楼2015-01-07 21:55:15
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-07 22:46:36
不知道您做的是不是载体构建,环状DNA是可以转化到细菌中,但是要用相应的抗性筛选,并且长出来的克隆也不能确定肯定包含您的连接产物,还需要后续的验证:菌落PCR,提取质粒进行酶切鉴定,蛋白表达鉴定等一系列的验证。
医学&统计学
3楼2015-01-07 22:07:34
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要有抗生素marker才能筛选,还要有ori, 不然没法在细菌里复制。很快环状DNA就都没了
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2015-01-07 23:50:03
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是只有环状才能转化的了。由于质粒的不兼容性,所以任何两个或两个以上(环状)质粒都可以进入感受态,但稳定存在只能是一种。
采菊东篱下,悠然见南山。
5楼2015-01-08 09:51:05
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