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苹果中多酚氧化酶的测定问题 已有1人参与
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测定干燥后苹果中多酚氧化酶活性，但是测得的OD变化值比为处理的苹果还高，也就表明酶活性比原来还高啦，这不符合逻辑啊。。 实验步骤： 酶的提取： 2g苹果+5mlPBS（pH6.4）+3%PVP，10000 g,4 摄氏度离心20min，取上清。 酶的测定： 0.2ml酶液+4mlPBS（pH6.4）+2ml邻苯二酚（0.065mol/L），400nm |
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2楼2016-05-30 09:31:43
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3楼2016-05-30 09:50:02
4楼2016-06-07 13:50:42
5楼2016-06-07 13:52:43
6楼2016-06-12 10:14:10
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应该不需要设置空白吧，就是画出，吸光值随时间变化曲线，去直线部分斜率作为酶活力。 取10ml鲜榨果浆与20ml4%(w/v)PVPP充分混合后在12000r/min离心20min后取上清液，即为PPO粗酶液。取1ml粗酶液于比色皿，加入1ml磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液再加入2ml0.2mol/L邻苯二酚溶液（用pH为6.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制）。（我把酶液稀释2.5、5、10倍都试过）。在波长为420nm处连续3min测定吸光值，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标，作出酶活力计算曲线。以吸光值每分钟增加0.001定义为一个酶活力单元，酶活力（R）根据以下公式计算： R=∆B/∆T÷0.001 式中B——酶活力计算曲线纵坐标， 单位1； T——酶活力计算曲线横坐标，单位min； ∆B/∆T——酶活力计算曲线中直线部分斜率 |
7楼2016-06-12 10:16:19
8楼2018-03-15 09:26:06
9楼2018-09-22 09:34:09
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