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奋斗小青年mm

新虫 (小有名气)

[求助] 苹果中多酚氧化酶的测定问题已有1人参与

测定干燥后苹果中多酚氧化酶活性,但是测得的OD变化值比为处理的苹果还高,也就表明酶活性比原来还高啦,这不符合逻辑啊。。
实验步骤:
酶的提取:
2g苹果+5mlPBS(pH6.4)+3%PVP,10000 g,4 摄氏度离心20min,取上清。
酶的测定:
0.2ml酶液+4mlPBS(pH6.4)+2ml邻苯二酚(0.065mol/L),400nm
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苏苏_22

新虫 (初入文坛)

你好,我想问下怎么设空白管呢?

发自小木虫Android客户端
4楼2016-06-07 13:50:42
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小沐饮吧

铁虫 (初入文坛)

你好,测多酚氧化酶活力的时候,酶液和邻苯二酚反应,
是要混合后充分摇匀在测光值得吗?
是不是吸光值会慢慢增加,怎么有些时候我做的会降低。。。
2楼2016-05-30 09:31:43
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奋斗小青年mm

新虫 (小有名气)

摇匀后再测定,两者反应吸光值增大,用吸光值变化量除以时间来表示酶活性

发自小木虫Android客户端
3楼2016-05-30 09:50:02
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苏苏_22

新虫 (初入文坛)

我之前设的空白是PBS和邻苯二酚的混合溶液,但是邻苯二酚自氧化,觉得好像也不能用来调零,所以不知道怎么设空白了,我是测某种抑制剂对酶的抑制作用!

发自小木虫Android客户端
5楼2016-06-07 13:52:43
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