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液相流动相配置问题（相同配置方法，分离结果差异） 已有2人参与
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液相流动相A、B相均由乙腈-甲醇-缓冲溶液组成，只是比例不一。但是配置得到的不同批次流动相，在分离目标体系（比较复杂）时，峰的分离结果不一 90min的梯度洗脱程序，在50-55min区段内两峰理想时R=1.0，不理想时两峰共洗脱成一个峰。 流动相配置时： 为了减少批次间的差异，用容量瓶进行缓冲盐溶液的配置（缓冲体系是KH2PO4-H3PO4) 每次调节pH前均会校准pH计 量取乙腈、甲醇和缓冲盐时用同一量筒以确保比例的准确 因为分离结果直接与不同批次有关，不存在同一批次的流动相分离结果有好有坏，所以应该不会是柱效的降低、流动相脱气不充分等问题 想请问造成不同批次流动相下分离效果差异的原因还有哪些，出现这样的问题是不是说明缓冲体系的缓冲容量不够呢？应该怎么解决？ Ps： Buffer: 10.2 g of monobasic potassium phosphate in a 1000-mL volumetric flask. Dissolve in 950 mL of water. While stirring, adjust with phosphoric acid to the target pH, and dilute with water to volume. Solution A: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:5:75) Solution B: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:30:50) |
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4楼2014-12-30 09:10:57
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