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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相流动相配置问题（相同配置方法，分离结果差异）
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张鑫yuki

木虫 (正式写手)

[求助] 液相流动相配置问题（相同配置方法，分离结果差异） 已有2人参与

液相流动相A、B相均由乙腈-甲醇-缓冲溶液组成，只是比例不一。但是配置得到的不同批次流动相，在分离目标体系（比较复杂）时，峰的分离结果不一
90min的梯度洗脱程序，在50-55min区段内两峰理想时R=1.0，不理想时两峰共洗脱成一个峰。

流动相配置时：
为了减少批次间的差异，用容量瓶进行缓冲盐溶液的配置（缓冲体系是KH2PO4-H3PO4)
每次调节pH前均会校准pH计
量取乙腈、甲醇和缓冲盐时用同一量筒以确保比例的准确

因为分离结果直接与不同批次有关，不存在同一批次的流动相分离结果有好有坏，所以应该不会是柱效的降低、流动相脱气不充分等问题

想请问造成不同批次流动相下分离效果差异的原因还有哪些，出现这样的问题是不是说明缓冲体系的缓冲容量不够呢？应该怎么解决？

Ps：
Buffer: 10.2 g of monobasic potassium phosphate in a 1000-mL volumetric flask. Dissolve in 950 mL of water. While stirring, adjust with phosphoric acid to the target pH, and dilute with water to volume.
Solution A: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:5:75)
Solution B: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:30:50)
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1楼 2014-12-28 22:18:02
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先看看是不是方法本身的问题
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2楼2014-12-29 16:04:17
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+3, 好久不见，欢迎常来分析版 2014-12-30 09:42:35
你是不是3相在一个量筒里加的，因为液体多相混合会造成体积的变化，所以3相不同顺序加入量筒肯定会造成流动相组分差异。建议3相先分别量取后在加入到一个瓶中，再过滤，过滤也要控制时间
赞一下(1人) 回复此楼
悲催的研发！
3楼2014-12-29 17:16:04
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张鑫yuki

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by e_liang369 at 2014-12-29 17:16:04
你是不是3相在一个量筒里加的，因为液体多相混合会造成体积的变化，所以3相不同顺序加入量筒肯定会造成流动相组分差异。建议3相先分别量取后在加入到一个瓶中，再过滤，过滤也要控制时间

我是用同一个量筒量，但不是累加到一个量筒里，一起倒进去
因为有机试剂都是非常纯的，所以我们只过滤缓冲盐，过滤后与有机相混合，过滤时间要控制是为了防止有机相挥发吗？
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4楼2014-12-30 09:10:57
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