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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 关于在流动相中加入三氟乙酸的问题
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欢子2046

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于在流动相中加入三氟乙酸的问题已有7人参与

我想用液相分离蛋白。我看一些文献里边都有说要加入0.1%或者0.05%的三氟乙酸，但是这两浓度下pH值都很低，这样会不会破坏柱子？？
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好吧，生物学战士
1楼2014-12-15 11:57:40
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欢子2046

铁虫 (初入文坛)
网上有帖子说加三乙胺调pH值，我想问有机相加三乙胺后也是用pH计测ph值嘛？
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好吧，生物学战士
2楼2014-12-15 11:59:06
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

★
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:33:57
加三氟乙酸主要是增加极性同时使走出的图谱峰型更规则。
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3楼2014-12-15 12:46:15
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:34:09
引用回帖:
2楼: Originally posted by 欢子2046 at 2014-12-15 11:59:06
网上有帖子说加三乙胺调pH值，我想问有机相加三乙胺后也是用pH计测ph值嘛？

三乙胺是扫尾剂，柱子调料通常是键合硅胶，部分未被封端的游离硅醇基可与碱性物质结合，导致拖尾。流动相加三乙胺后，氨基与碱性物质竞争结合，抑制色谱峰拖尾而起到扫尾的作用
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4楼2014-12-15 13:30:54
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:34:15
一般情况下不会，0.1的三氟乙酸pH为2左右，一般柱子还耐得住。三氟乙酸有一定溶解蛋白的作用，走高分子时是比较常用的添加物
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5楼2014-12-15 13:32:59
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voyager88

金虫 (著名写手)
★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:34:26
引用回帖:
4楼: Originally posted by voyager88 at 2014-12-15 13:30:54
三乙胺是扫尾剂，柱子调料通常是键合硅胶，部分未被封端的游离硅醇基可与碱性物质结合，导致拖尾。流动相加三乙胺后，氨基与碱性物质竞争结合，抑制色谱峰拖尾而起到扫尾的作用...

一般色谱法里，流动相是酸性或是中性的，极少使用碱性，而且一般柱子也不耐碱，所以三乙胺一般搭配缓冲盐使用。三乙胺碱性比较强，并非是用于调pH的，是扫尾剂
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6楼2014-12-15 13:35:25
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:34:34
赞同楼上观点。另，一般不用有机相去测pH，不准，三乙胺的添加量一般也就0.05%~0.1%，主要用于扫尾而非调节pH，碱性流动相调pH的一般用与缓冲盐对应的碱。
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铁甲依然在
7楼2014-12-15 15:31:13
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呀呀好傻

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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最后你还得将样品调到中性，流动相也调到中性就好了
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父母在人生尚有来处父母走人生只剩归途
8楼2014-12-15 16:56:23
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匿名

禁虫 (知名作家)
本帖仅楼主可见
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9楼2014-12-16 12:39:11
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zkk1222

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你加的话 最好是精确的测量一次PH后就可以了，以后每次配置的时候 就按上一次添加的准确量配制即可，不需要每次都精确测量，之后的每次只需要用PH试纸一侧就OK
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10楼2014-12-16 20:22:40
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