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光明谷

新虫 (初入文坛)

[求助] 0.1%三氟乙酸乙腈溶液流动相

本人是HPLC新手,看到一篇文献中方法是这样的:0--10min 5%乙腈(v/v)(含0.1%(v/v)TFA),10.1--50min 5%--40%乙腈(v/v)(含0.1%(v/v)TFA),1ml/min,25°C。这里是不是直接往乙腈里加入0.1%的TFA啊,能这样配流动相吗,还有这里默认的另一相是不是水啊? 请高手指教啊,非常感谢!
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是纯水,三氟乙酸加到水相中。有机相为纯乙腈。
守候在风中的宁静。
2楼2012-06-13 12:16:49
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houqian387

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是这样的,如果是两相梯度
1、流动相为缓冲盐,可以只加到一相中,也可以吧起始比例预混到一相中。
2、流动相为酸碱,比如说0.1%TFA,建议把另外一相也混成同比例的酸碱,防止在梯度运行中流动相pH变化引起峰形和保留变化。当然也可以加到一相中,要看具体情况
3楼2012-06-13 13:17:11
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
文献中写的不是非常清楚,可以这样理解,水相和乙腈相均含0.1%TFA,这样配比较好
梦想、激情、灵感、体验--che
4楼2012-06-13 13:24:24
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lantao8823

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1, 写的V/V ,所以是直接往乙腈里加入0.1%的TFA啊,体积比;
2, 另一相没写,明显是纯水
人生最重要的课题:学会坚强。
5楼2012-06-13 13:25:54
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光明谷

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by houqian387 at 2012-06-13 13:17:11
是这样的,如果是两相梯度
1、流动相为缓冲盐,可以只加到一相中,也可以吧起始比例预混到一相中。
2、流动相为酸碱,比如说0.1%TFA,建议把另外一相也混成同比例的酸碱,防止在梯度运行中流动相pH变化引起峰形和 ...

我要分离的是混合物,主要成分是多肽还有氨基酸及小分子,文献中的意思是不是把0.1%TFA加入到乙腈中,而另一相为纯水,梯度运行的同时也有一个PH的梯度变化?谢谢
6楼2012-06-13 13:33:23
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houqian387

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


光明谷: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-06-15 14:37:28
可以想象一下,1相有TFA另外1相没有,梯度运行中是不是TFA的比例一直在变?
那是不是pH也一直在变?
如果待测样品对pH不敏感可以加到1相中,如果pH影响峰形和保留就必须加到2相中。
7楼2012-06-13 14:26:09
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8楼2023-04-10 11:26:52
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