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0.1%三氟乙酸乙腈溶液流动相
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光明谷
新虫
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]
0.1%三氟乙酸乙腈溶液流动相
本人是HPLC新手,看到一篇文献中方法是这样的:0--10min 5%乙腈(v/v)(含0.1%(v/v)TFA),10.1--50min 5%--40%乙腈(v/v)(含0.1%(v/v)TFA),1ml/min,25°C。这里是不是直接往乙腈里加入0.1%的TFA啊,能这样配流动相吗,还有这里默认的另一相是不是水啊? 请高手指教啊,非常感谢!
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1楼
2012-06-13 12:05:13
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光明谷
新虫
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专业: 神经生物学
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3楼
:
Originally posted by
houqian387
at 2012-06-13 13:17:11
是这样的,如果是两相梯度
1、流动相为缓冲盐,可以只加到一相中,也可以吧起始比例预混到一相中。
2、流动相为酸碱,比如说0.1%TFA,建议把另外一相也混成同比例的酸碱,防止在梯度运行中流动相pH变化引起峰形和 ...
我要分离的是混合物,主要成分是多肽还有氨基酸及小分子,文献中的意思是不是把0.1%TFA加入到乙腈中,而另一相为纯水,梯度运行的同时也有一个PH的梯度变化?谢谢
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6楼
2012-06-13 13:33:23
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痴夷子皮
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是纯水,三氟乙酸加到水相中。有机相为纯乙腈。
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守候在风中的宁静。
2楼
2012-06-13 12:16:49
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houqian387
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【答案】应助回帖
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是这样的,如果是两相梯度
1、流动相为缓冲盐,可以只加到一相中,也可以吧起始比例预混到一相中。
2、流动相为酸碱,比如说0.1%TFA,建议把另外一相也混成同比例的酸碱,防止在梯度运行中流动相pH变化引起峰形和保留变化。当然也可以加到一相中,要看具体情况
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3楼
2012-06-13 13:17:11
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guevara1967
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【答案】应助回帖
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文献中写的不是非常清楚,可以这样理解,水相和乙腈相均含0.1%TFA,这样配比较好
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梦想、激情、灵感、体验--che
4楼
2012-06-13 13:24:24
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