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欢子2046

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于在流动相中加入三氟乙酸的问题 已有7人参与

我想用液相分离蛋白。我看一些文献里边都有说要加入0.1%或者0.05%的三氟乙酸,但是这两浓度下pH值都很低,这样会不会破坏柱子??
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好吧,生物学战士
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欢子2046

铁虫 (初入文坛)

网上有帖子说加三乙胺调pH值,我想问有机相加三乙胺后也是用pH计测ph值嘛?
好吧,生物学战士
2楼2014-12-15 11:59:06
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖


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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:33:57
加三氟乙酸主要是增加极性同时使走出的图谱峰型更规则。
3楼2014-12-15 12:46:15
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:34:09
引用回帖:
2楼: Originally posted by 欢子2046 at 2014-12-15 11:59:06
网上有帖子说加三乙胺调pH值,我想问有机相加三乙胺后也是用pH计测ph值嘛?

三乙胺是扫尾剂,柱子调料通常是键合硅胶,部分未被封端的游离硅醇基可与碱性物质结合,导致拖尾。流动相加三乙胺后,氨基与碱性物质竞争结合,抑制色谱峰拖尾而起到扫尾的作用
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
4楼2014-12-15 13:30:54
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:34:15
一般情况下不会,0.1的三氟乙酸pH为2左右,一般柱子还耐得住。三氟乙酸有一定溶解蛋白的作用,走高分子时是比较常用的添加物
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
5楼2014-12-15 13:32:59
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voyager88

金虫 (著名写手)


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:34:26
引用回帖:
4楼: Originally posted by voyager88 at 2014-12-15 13:30:54
三乙胺是扫尾剂,柱子调料通常是键合硅胶,部分未被封端的游离硅醇基可与碱性物质结合,导致拖尾。流动相加三乙胺后,氨基与碱性物质竞争结合,抑制色谱峰拖尾而起到扫尾的作用...

一般色谱法里,流动相是酸性或是中性的,极少使用碱性,而且一般柱子也不耐碱,所以三乙胺一般搭配缓冲盐使用。三乙胺碱性比较强,并非是用于调pH的,是扫尾剂
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
6楼2014-12-15 13:35:25
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-12-15 15:34:34
赞同楼上观点。另,一般不用有机相去测pH,不准,三乙胺的添加量一般也就0.05%~0.1%,主要用于扫尾而非调节pH,碱性流动相调pH的一般用与缓冲盐对应的碱。
铁甲依然在
7楼2014-12-15 15:31:13
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呀呀好傻

金虫 (职业作家)

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最后你还得将样品调到中性,流动相也调到中性就好了
父母在人生尚有来处父母走人生只剩归途
8楼2014-12-15 16:56:23
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匿名

禁虫 (知名作家)

本帖仅楼主可见
9楼2014-12-16 12:39:11
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zkk1222

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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你加的话 最好是精确的测量一次PH后就可以了,以后每次配置的时候 就按上一次添加的准确量配制即可,不需要每次都精确测量,之后的每次只需要用PH试纸一侧就OK
10楼2014-12-16 20:22:40
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