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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 有关肝微粒体试验
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taxue314

新虫 (初入文坛)

[求助] 有关肝微粒体试验 已有1人参与

想做药物代谢稳定性实验，但是不知道怎么确定药物的浓度，建立分析方法时需要按照生物样品标准去建立吗？需要做肝微粒体空白吗
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1楼 2014-12-10 19:15:31
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冰湖倩影

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
taxue314: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-12-16 18:00:13
这方面我们做的比较多，
肝微粒体稳定性需要几点供你参考：

1. 底物浓度的选择，不适宜太高，浓度太高，酶促反应会饱和，1uM 浓度胶适合
2.需要做阳性对照，如CYP3A4特异性底物，考察购买的或自制酶的活性。
3.需要阴性对照，即不加NADPH, 考虑是否是非氧化代谢。
4.肝微粒体空白按道理也是要做的，是把酶高温失活，只有蛋白，但是没有了催化活性。

生物分析方法是肯定要建立的，一般需要定量，偷懒的话可以计算面积百分比，但还是建议定量。
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2楼2014-12-14 19:27:33
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taxue314

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冰湖倩影 at 2014-12-14 19:27:33
这方面我们做的比较多，
肝微粒体稳定性需要几点供你参考：

1. 底物浓度的选择，不适宜太高，浓度太高，酶促反应会饱和，1uM 浓度胶适合
2.需要做阳性对照，如CYP3A4特异性底物，考察购买的或自制酶的活性。
...

可不可以给个联系方式，我这方面不懂的真的很多
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3楼2014-12-16 18:01:34
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