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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » Hep-G2转染问题
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lichangcai

新虫 (初入文坛)

[求助] Hep-G2转染问题 已有1人参与

各位前辈：我用的12孔板接种的Hep-G2肝癌细胞，转染试剂Turbofect加入6小时后对照组细胞、和实验组细胞就全变得又小又圆了，24小时后就全死了，不知道怎么回事？谢谢了
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1楼 2014-12-09 19:24:52
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-12-12 12:23:48
我们实验室之前也一直在用Hep G2细胞，转染效率还是挺好的，不过我们没有用过Turbofect转染试剂，一般用的是 Vigofect或者 Lipofectamine2000，没有出现您说的那种情况。
建议：1. 用去内毒素的质粒进行转染（如果用Vigofect或者 Lipofectamine2000是没有必要的），用于转染的质粒浓度纯度要高
         2. 转染时细胞培养液是无抗生素的
         3. 转染6小时内细胞培养液是无血清的（Vigofect可以有血清， Lipofectamine2000要求无血清，具体看说明说），转染6小时后换含血清的培养基
         4. 转染时细胞状态一定要好
Hep G2细胞还是“生命力”很强大的，转染后坚持2,3天是没有问题的，要是还是不行，建议您重新复苏或购买Hep G2细胞
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医学&统计学
2楼2014-12-12 11:10:01
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lichangcai

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2014-12-12 11:10:01
我们实验室之前也一直在用Hep G2细胞，转染效率还是挺好的，不过我们没有用过Turbofect转染试剂，一般用的是 Vigofect或者 Lipofectamine2000，没有出现您说的那种情况。
建议：1. 用去内毒素的质粒进行转染（如果 ...

非常感谢楼上的
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3楼2014-12-17 10:19:08
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