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Hep-G2转染问题 已有1人参与
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| 各位前辈：我用的12孔板接种的Hep-G2肝癌细胞，转染试剂Turbofect加入6小时后对照组细胞、和实验组细胞就全变得又小又圆了，24小时后就全死了，不知道怎么回事？谢谢了 |
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董博士
金虫 (正式写手)
- 应助: 155 (高中生)
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- 红花: 24
- 帖子: 312
- 在线: 96.2小时
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- 专业: 医学图像数据处理与分析
【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-12-12 12:23:48
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我们实验室之前也一直在用Hep G2细胞，转染效率还是挺好的，不过我们没有用过Turbofect转染试剂，一般用的是 Vigofect或者 Lipofectamine2000，没有出现您说的那种情况。 建议：1. 用去内毒素的质粒进行转染（如果用Vigofect或者 Lipofectamine2000是没有必要的），用于转染的质粒浓度纯度要高 2. 转染时细胞培养液是无抗生素的 3. 转染6小时内细胞培养液是无血清的（Vigofect可以有血清， Lipofectamine2000要求无血清，具体看说明说），转染6小时后换含血清的培养基 4. 转染时细胞状态一定要好 Hep G2细胞还是“生命力”很强大的，转染后坚持2,3天是没有问题的，要是还是不行，建议您重新复苏或购买Hep G2细胞 |
2楼2014-12-12 11:10:01
3楼2014-12-17 10:19:08