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lichangcai

新虫 (初入文坛)

[求助] Hep-G2转染问题 已有1人参与

各位前辈:我用的12孔板接种的Hep-G2肝癌细胞,转染试剂Turbofect加入6小时后对照组细胞、和实验组细胞就全变得又小又圆了,24小时后就全死了,不知道怎么回事?谢谢了
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-12-12 12:23:48
我们实验室之前也一直在用Hep G2细胞,转染效率还是挺好的,不过我们没有用过Turbofect转染试剂,一般用的是 Vigofect或者 Lipofectamine2000,没有出现您说的那种情况。
建议:1. 用去内毒素的质粒进行转染(如果用Vigofect或者 Lipofectamine2000是没有必要的),用于转染的质粒浓度纯度要高
         2. 转染时细胞培养液是无抗生素的
         3. 转染6小时内细胞培养液是无血清的(Vigofect可以有血清, Lipofectamine2000要求无血清,具体看说明说),转染6小时后换含血清的培养基
         4. 转染时细胞状态一定要好
Hep G2细胞还是“生命力”很强大的,转染后坚持2,3天是没有问题的,要是还是不行,建议您重新复苏或购买Hep G2细胞
医学&统计学
2楼2014-12-12 11:10:01
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lichangcai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2014-12-12 11:10:01
我们实验室之前也一直在用Hep G2细胞,转染效率还是挺好的,不过我们没有用过Turbofect转染试剂,一般用的是 Vigofect或者 Lipofectamine2000,没有出现您说的那种情况。
建议:1. 用去内毒素的质粒进行转染(如果 ...

非常感谢楼上的
3楼2014-12-17 10:19:08
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