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1楼2014-12-07 15:30:05

guoliwang

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【答案】应助回帖

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霍烨zz(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-07 19:39:22
霍烨zz: 金币+9, ★★★很有帮助 2014-12-07 23:02:24

建议你把肠黏膜组织直接冻存送公司，让他们自己提纯、鉴定，然后建库，也不会增加很多费用。RNA如果发生降解，解决起来很麻烦。提纯高质量RNA对专门做这个的公司来说就简单了。

慎思明辨博学笃行

2楼2014-12-07 18:55:11

霍烨zz

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引用回帖:

2楼: Originally posted by guoliwang at 2014-12-07 18:55:11
建议你把肠黏膜组织直接冻存送公司，让他们自己提纯、鉴定，然后建库，也不会增加很多费用。RNA如果发生降解，解决起来很麻烦。提纯高质量RNA对专门做这个的公司来说就简单了。

也直接送了肠粘膜的组织样，结果还是不行啊！

这是同一个批次的样品，感觉还没有我送RNA样的结果好.......

不知道是怎么回事，难道真的不能刮粘膜吗？
可是那么多的文献中都是刮粘膜，别人都还做出来了、
我是真的不知道该怎么改进了

3楼2014-12-07 23:10:37

990104036

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【答案】应助回帖

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霍烨zz: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2015-01-22 10:38:24

你为何保存样品的时候就加入Trizol呢？我们实验室经常做肠道RNA。取样的时候按你说的方法洗干净(其实也没必要那么认真，很多时候都是直接取肠断，不刮粘膜)，取样后放入试管中冷冻。当开始做实验的时候，把样品磨成粉末状后与Trizol试剂。后面的过程都是那些就不说了。整个过程中切记，在离心完成后取上清液一定小心，别把沉淀物取上来。

赞一下(2人)

跟党走，有肉吃。

4楼2015-01-21 20:50:00

霍烨zz

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引用回帖:

4楼: Originally posted by 990104036 at 2015-01-21 20:50:00
你为何保存样品的时候就加入Trizol呢？我们实验室经常做肠道RNA。取样的时候按你说的方法洗干净(其实也没必要那么认真，很多时候都是直接取肠断，不刮粘膜)，取样后放入试管中冷冻。当开始做实验的时候，把样品磨成 ...

取样的时候就加trizol是听从了公司的建议，因为trizol中有RNA酶抑制剂，所以可能会好点
最近的一次取样，已经不刮粘膜了，直接用的肠段液氮速冻后-80保存；
也是直接送的肠段样品去公司，质检结果还没出来，希望一切顺利吧！

5楼2015-01-22 10:41:23

liubolin945

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【答案】应助回帖

我自身有点经验，因为刚开始做，感触不多，不知道能不能帮到你。
我在提取组织的时候发现用生理盐水清洗过的提取RNA质量都不高，不如直接液氮冻存。
买过一个RNA sample的试剂，还没用，是保存样品的，不让RNA降解，可以常温保存1个月，-20保存1年，效果还没试验不清楚，但是我估计是可以的。
不知道你的生理盐水是自己配置的还是买医疗器械的，我当时是药店买的，

QQ：277046172

6楼2015-03-22 12:51:20