24小时热门版块排行榜    

查看: 471  |  回复: 2
本帖产生 1 个 博学EPI ,点击这里进行查看

miao2010

木虫 (正式写手)

[求助] 细菌的分子鉴定

各位虫友:
           大家好,本人在做细菌的分子鉴定时,出现了些故障。每次细菌DNA提取完后,进行PCR,再送出去测序,要测的片段是750bp左右,但测序结果始终从500bp以后都有双峰,我也改变了退火温度,但效果不明显。能确保是单一菌落提DNA,除了连梯载,还有什么办法吗?请各位指点指点,在此谢过了。
            PCR引物:1405f(5'-TGYACACACCGCCCGT-3')
                            456r(5'-CCTTT CCCTCACGGTACTG -3')
              程序:94度,5min
                         94度,1min
                         61度,1min
                         72度,90s
                         72度,10min

细菌的分子鉴定
bw988h2502922_1409724304_617.jpg


细菌的分子鉴定-1
bw988h2502922_1409724304_617.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

厚积薄发,天道酬勤
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
miao2010: 金币+45, 博学EPI+1 2014-12-09 11:55:20
你PCR引物命名为什么大序号用f(forward),小序号用r(reverse)呢?
测序只用了正向引物么?可以用反向引物测序,应该500bp后面的信号会比较清楚。
如果想用单引物测通,可以提高PCR产物的浓度。比如增加PCR反应体积或者增加一管PCR反应,产物浓缩后的体积不变。
慎思明辨博学笃行
2楼2014-12-06 18:45:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

miao2010

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guoliwang at 2014-12-06 18:45:47
你PCR引物命名为什么大序号用f(forward),小序号用r(reverse)呢?
测序只用了正向引物么?可以用反向引物测序,应该500bp后面的信号会比较清楚。
如果想用单引物测通,可以提高PCR产物的浓度。比如增加PCR反应体积 ...

好的,谢谢。我做的双向测序,正反向都测,体积已经25微升了
厚积薄发,天道酬勤
3楼2014-12-09 11:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 miao2010 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +4 曼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:44 by 星空星月
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 07化学280分求调剂 +4 722865 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:01 by chixmc
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 085600材料与化工调剂 +7 A-哆啦Z梦 2026-03-23 12/600 2026-03-23 23:16 by 星空星月
[考研] 材料专硕英一数二306 +8 z1z2z3879 2026-03-18 8/400 2026-03-23 20:49 by baobaoye
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
信息提示
请填处理意见