| 查看: 4168 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
southern blot酶切基因组问题 已有2人参与
|
||
| 如题，做southern blot时，在酶切基因组的时候应该用单切还是双酶切？看好多说单酶切，那么单酶切之后探针结合的条带大小为什么会和敲入的基因大小相同？单切应该不可能正好切下来目的片段的啊 ，切下来大小不一样跑的位置肯定不一样的啊。。。求解！ |
回复此楼» 猜你喜欢
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有91人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 基因组DNA 酶切后条带不清晰，什么原因啊？
已经有15人回复
- DNA苯酚氯仿抽提问题
已经有3人回复
- 真菌基因组提取
已经有6人回复
- 有没有会做啊 ？我想死的心都有了啊。。。DNA酶切模拟软件。基因三维结构观察等等
已经有3人回复
- 基因组酶切问题！急！
已经有7人回复
- 基因和酶的编号为什么不一样？
已经有4人回复
- southern blot 内切酶和探针设计
已经有6人回复
- southern blot 确定基因拷贝数原理是什么？
已经有4人回复
- TEV蛋白酶酶切体系是什么样的？
已经有6人回复
- 大家来说说做southern blot时，基因组DNA的提取方法
已经有39人回复
- 关于northern southern一些问题
已经有3人回复
- 请大家帮我看看我的southern blot 图片，不知道问题出在哪里了，谢谢
已经有16人回复
- southern blot实验求助
已经有10人回复
- EcoRI 酶切细菌基因组切不开
已经有19人回复
- southern blot 的酶切问题
已经有9人回复
- southern杂交问题
已经有12人回复
- 环状基因组的PCR
已经有4人回复
- southern杂交检测基因拷贝数的原理是什么？
已经有19人回复
- Southern Blot转膜用什么仪器？
已经有3人回复
- 【求助/交流】southern blot 转膜
已经有10人回复
- 【求助/交流】Westen blot问题请教
已经有8人回复
- 【求助/交流】怎样确定一个基因在基因组中是不是单拷贝
已经有5人回复
3楼2014-12-04 00:48:08
ksws0465326
金虫 (小有名气)
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 885.4
- 红花: 6
- 帖子: 124
- 在线: 74.5小时
- 虫号: 3263751
- 注册: 2014-06-09
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cnzpli(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励热心回帖交流 2014-12-04 19:54:39
感谢参与，应助指数 +1
cnzpli(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励热心回帖交流 2014-12-04 19:54:39
做southern的话，我一般都选单酶切，先利用软件查找你要酶切坚定的片段上下游大概5k到10k bp的序列，然后从中确定要是用的霉，因为一个酶在目的基因或者目的基因其上下游都可能存在酶切位点，所以我的话一般都找目的基因内没有酶切位点，而在其上下游附近都存在酶切位点的酶，两位点之间的碱基数也可知，假如为5000bp而目的基因片段为3000bp，则探针结合到酶切片段时因为此片段为5000bp所以结果显示为5000bp的条带。如果你找的单酶切在目的基因和其上下游均有位点，例如还是5000的片段，目的基因在其中的1500到4500，你选的酶在目的基因上的第500个碱基位置进行酶切，也就是说目的基因分为500，和2500，因此，此5000bp的片段就分为了2000bp和3000bp的条带，探针虽然是目的片段的全长，但还是可以结合到被切割为两段的片段上，所以检测出来就显示为2000和3000的条带了。不知道以上的讲解能否为楼主解惑。。。 |
2楼2014-12-03 22:02:03
4楼2014-12-04 14:21:05
5楼2014-12-04 14:28:15
