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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 蛋白质分离纯化问题
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subtiger

铁虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质分离纯化问题 已有6人参与

粗肽液用层析柱纯化，流动相是PBS，层析柱是G25，分离之后得到的组分冷冻干燥。最后所得的样品粉末中，大部分都是盐~~~测定肽浓度含量也很低，测定活性的时候，由于盐浓度过高，加乙醇析出，也会影响实验结果~~~~~
      试验该如何进行下去，求解~~~~~
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1楼 2014-12-01 17:26:46
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Leto_novo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可用50 mM的碳酸氢铵缓冲液或者G25纯化后走一遍HPLC反相纯化后再冻干
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6楼2014-12-30 20:57:25
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jjf139

金虫 (著名写手)

新药研发&药物分析

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
过脱盐柱或透析，含盐高后续很多检测都会有影响

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2014-12-01 18:05:02
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amesy0129

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以考虑超滤，但是蛋白可能有损耗，量大的话可以试试。
常用的方法就是透析。
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3楼2014-12-02 09:34:22
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siashq

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

将G25流动相PBS改成挥发性缓冲成分，并不含氯化钠，冻干后就无盐了。此法最省事，无需额外透析或超滤步骤。
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4楼2014-12-05 09:23:42
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