24小时热门版块排行榜    

查看: 1471  |  回复: 5

懒一番

新虫 (初入文坛)

[求助] 求大神指点,ERIC-PCR基本没有条带,出现引物二聚体 已有2人参与

求大神指点,ERIC-PCR基本没有条带,出现引物二聚体
兔粪做多态性,ERIC-PCR多次没效果,反应条件是:95℃ 5min,30个循环( 94℃ 1min,  52℃ 1min ,65℃ 8min )65℃ 16min
25微升体系:模板4.5μL,引物各0.5μL(100μmol/L),10*扩增缓冲液(含Mg离子)2.5μL,dNTP(10mmol/L),Taq酶0.5μL,双蒸水16μL。
0.1%的琼脂糖凝胶,90V 30min,得到的电泳图 http://\"求大神指点,ERIC-PCR基本没有条带,出现引物二聚体\"

求大神指点,ERIC-PCR基本没有条带,出现引物二聚体-1
IMG_20141121_164934_1417083687521.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赵慧铮

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你是用粪便培养出来之后进行鉴定没?ERIC-PCR好像阴性菌做的比较多,尤其是肠杆菌科细菌,不知你做的是什么
2楼2014-12-16 21:02:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

懒一番

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 赵慧铮 at 2014-12-16 21:02:26
你是用粪便培养出来之后进行鉴定没?ERIC-PCR好像阴性菌做的比较多,尤其是肠杆菌科细菌,不知你做的是什么

我是直接从兔粪中提所有细菌的DNA当模版做的,但效果一直不好,是不是模版的问题啊?
3楼2014-12-27 15:17:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl25413477

木虫 (正式写手)

欧巴

你用的marker是多大的?
路漫漫兮,吾必上下而求索!
4楼2014-12-27 17:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl25413477

木虫 (正式写手)

欧巴

【答案】应助回帖

有设置对照么?那个泳道是啊
路漫漫兮,吾必上下而求索!
5楼2014-12-27 17:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

solomon7811

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应当是模板的问题,如果是粗提的DNA你按照2X,5X,10X对模板做稀释,然后再进行PCR。
PS:
25ul加4.5ul模板,是不是多了点,占体系总体积的1/5,万一存在抑制物,很可能P不出来东西!
引物浓度貌似也很高啊!
6楼2014-12-30 19:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 懒一番 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[考研] 招08考数学 +6 laoshidan 2026-03-20 14/700 2026-03-23 14:37 by 15614359529
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
信息提示
请填处理意见