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小天虾

木虫 (正式写手)

[求助] 天根DNA提取试剂盒GB的作用已有3人参与

大家好,最近在用天根的试剂盒做提取,有一个疑问,GB 有什么作用呢,在我理解GA能悬浮并裂解细胞,然后加蛋白酶K消化,这时候蛋白质已经和DNA分离了,但是下面的一步加GB,能起到什么作用呢?我看网上有说是裂解、使蛋白和核酸分离,但是上一步加蛋白酶K的时候,已经分离过了哦。很是不解。
谢谢大家。
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小天虾(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-23 12:34:28
我给你上传了一个官方原版的说明书!仔细看看!

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  • 附件 1 : DNeasy-Plant-Handbook--July-2006-EN.pdf
  • 2014-11-22 19:10:45, 488.37 K
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-11-22 19:09:27
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小天虾

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-11-22 19:09:27
我给你上传了一个官方原版的说明书!仔细看看!

看的不是非常明白,前辈给指点一下
3楼2014-11-22 21:24:44
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小天虾 at 2014-11-22 21:24:44
看的不是非常明白,前辈给指点一下...

好好翻译下,没什么难的!
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
4楼2014-11-22 21:41:20
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小天虾

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-11-22 21:41:20
好好翻译下,没什么难的!...

我看的是石蜡包埋的,凯杰的。你给我的我也看了,可能有一些和动物组织的不太一样。
你给我的操作手册有这样一句话:
9. Add 130 μl Buffer AP2 to the lysate, mix, and incubate for 5 min on ice.
This step precipitates detergent, proteins, and polysaccharides.
是不是AP2的作用就是沉淀一些蛋白,多糖的作用?

但是我看的石蜡包埋的是这么说的:
14. Add 200μl Buffer AL to the sample, and mix thoroughly by vortexing. Then add 200μl ethanol (96–100%),and mi xagain thoroughly by vortexing.
It is essential that the sample, Buffer AL, and ethanol are mix edimmediately and thoroughly by vortexing or pipetting to yield a homogeneous solution.
解释的不是很多,还请前辈明示,GB和添加的乙醇是做什么用的。初次提取,见笑了
5楼2014-11-23 01:23:54
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

引用回帖:
5楼: Originally posted by 小天虾 at 2014-11-23 01:23:54
我看的是石蜡包埋的,凯杰的。你给我的我也看了,可能有一些和动物组织的不太一样。
你给我的操作手册有这样一句话:
9. Add 130 μl Buffer AP2 to the lysate, mix, and incubate for 5 min on ice.
This step ...

大同小异,AP2沉淀蛋白等杂质
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
6楼2014-11-23 09:01:16
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zhaokexue

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
实在不行用全是金试剂盒,比天根的好用,当然比那个日本货稍微差点(takala)

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-11-23 13:54:36
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风凉西厢月

新虫 (初入文坛)

依旧不懂。
8楼2015-10-26 21:05:43
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hcf321283

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我只在天根的口腔拭子的试剂盒中用到过GA,血液和组织的都是直接GB了。根据样本的特性,感觉GA作用应该是起到悬浮细胞的作用,GB才是是核酸和蛋白分离。
9楼2015-10-27 09:53:01
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mysuccess

新虫 (初入文坛)

GB是杀死GA的,GA只是提供蛋白酶k作用的环境。
10楼2016-09-06 16:54:49
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