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123n

木虫 (正式写手)

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[求助] 怎样检测细菌中一个基因的表达量？想用定量检测！已有4人参与

怎样检测细菌中一个基因的表达量？想用定量检测，需要提取总RNA。直接用RNA做模板定量，还是把RNA反转录呢？
求大神支招！！！！！

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1楼2014-11-21 10:22:53

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wanglei512

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 123n at 2014-11-22 08:53:30
绝对定量也可以估计一个基因的表达量嘛？我用绝对定量测过一个基因的拷贝数！
...

对于细菌，如果你要定量细菌的个数，可以用基因组DNA，如果要定量基因的表达量可以用CDNA。相对定量只是基因表达量相对内参基因的一个比值，是百分比，绝对定量是具体到拷贝数（根据标准曲线），有啥不可以。这里标准曲线和内参的作用不就是一样的吗，两种方法都是用pcr，都是用相同的引物，都是相同的模板，只是用不同的度量单位表示。