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123n

木虫 (正式写手)

[求助] 怎样检测细菌中一个基因的表达量?想用定量检测!已有4人参与

怎样检测细菌中一个基因的表达量?想用定量检测,需要提取总RNA。直接用RNA做模板定量,还是把RNA反转录呢?
求大神支招!!!!!
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123n

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wanglei512 at 2014-11-21 20:58:41
细菌最好做绝对定量 ,设计特异性引物,扩增基因上的特异性片段(50-500bp),连接T载体(其它载体也可以),测序正确后,作为标准质粒,构建标准曲线,来做绝对定量。有些是拿16SrRNA基因保守区作为内参,做相对定 ...

绝对定量也可以估计一个基因的表达量嘛?我用绝对定量测过一个基因的拷贝数!

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-11-22 08:53:30
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

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[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-11-21 10:26:45
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123n

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-11-21 10:26:45
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我想做乳酸菌的基因定量,用什么内参呢?
3楼2014-11-21 10:38:09
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 123n at 2014-11-21 10:38:09
我想做乳酸菌的基因定量,用什么内参呢?...

是贝塔-actin吗?我没做过你这个

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-11-21 10:39:56
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