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xiaoxi8601

银虫 (小有名气)

[求助] 生物样品提取回收率计算问题 已有2人参与

提取回收率具体算法,例如:1.取100μl空白血浆,加100ng/ml药的标准溶液10μl,混悬加400μl甲醇沉蛋白离心,取200μl上清进样得峰面积A1.
                                       2.取100μl空白血浆,加400μl甲醇沉蛋白离心,取上清200μl,加药标准溶液20μl后进样,得峰面积A2.
                                       3.提取回收率=A
现在问题是2步里所加标准溶液的浓度是多少呢?1步中最后取的200μl上清中药的浓度算出是2ng/ml,那么在第二步中最后是应加入20ng/ml的药的标准溶液么?帮我看看这么做对么,求指点浓度具体的数值
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
100ng/ml药的标准溶液10μl,加500μl流动相混匀,取200μl进样
或者取100μl空白血浆,加400μl甲醇沉蛋白离心,取上清500μl,加100ng/ml药的标准溶液10μl,混匀后取200μl进样;不过第二种方法涉及到一个补体积的问题,否则可能取不到500μl上清
3楼2014-11-21 14:38:52
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hongchong134

新虫 (初入文坛)

一般不都要把上清液吹干,然后复溶吗?
我是这么做的,1.空白血浆90微升+标准品10微升,沉淀蛋白后,取上清液,吹干,200微升复溶,进样,得A1。2.标准品10微升吹干,200微升溶剂复溶,进样,得A2.提取率=A1/A2*100%
2楼2014-11-21 13:38:02
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renzhichu525

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的步骤2可以这么操作:制备空白上清液,.取100μl空白上清液,加100ng/ml药的标准溶液10μl,混悬加400μl甲醇沉蛋白离心,取200μl上清进样得峰面积A2.
4楼2014-12-08 13:37:14
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