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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 血浆样品萃取率低高浓度不一致，影响校正曲线和定量吗？
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xiaoqiu2010

金虫 (小有名气)

[求助] 血浆样品萃取率低高浓度不一致，影响校正曲线和定量吗？ 已有2人参与

测定一药物在血浆中的含量，在做方法学时有以下疑问，望各位虫友给予指点：
1、用液液萃取法提取血浆中药物，计算得出低中高浓度的萃取回收率不一致（分别为72%，81%和77%），这影响校正曲线和定量吗？为什么？
2、一般考察血浆样品常温下的稳定性的时间是多长？6小时可以吗（我们实验室通常做6h）？这有规定吗？
谢谢！
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边走边学，边学边用，边用边问
1楼 2014-04-09 11:12:22
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xiaoli1987

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般考察血浆样品常温下的稳定性的时间至少一周吧，处理后的样品至少能存放24h.
萃取回收率不一致肯定会影响线性啦，一般最好用内标法。
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2楼2014-04-09 15:04:32
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xiaoqiu2010

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoli1987 at 2014-04-09 15:04:32
一般考察血浆样品常温下的稳定性的时间至少一周吧，处理后的样品至少能存放24h.
萃取回收率不一致肯定会影响线性啦，一般最好用内标法。

就是用的内标法做的线性，但是因为结果中萃取回收率有差别，我们实验室有老师提出疑问说会影响线性。请问你们有遇到这种情况吗？
谢谢
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边走边学，边学边用，边用边问
3楼2014-04-09 15:13:42
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xiaoqiu2010

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoli1987 at 2014-04-09 15:04:32
一般考察血浆样品常温下的稳定性的时间至少一周吧，处理后的样品至少能存放24h.
萃取回收率不一致肯定会影响线性啦，一般最好用内标法。

一般将血浆样品从冰箱中拿出，到处理的时间不会超过一天。在考察样品常温稳定性的时候不是只要合理（即保证样品在这段时间内处理完）就可以了吗？我觉得6小时应该可以吧？
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边走边学，边学边用，边用边问
4楼2014-04-09 15:18:59
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xiaoli1987

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我看到资料和发表的文章都是24h,样品考察7天
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5楼2014-04-09 15:40:40
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rosegarden

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoqiu2010 at 2014-04-09 15:13:42
就是用的内标法做的线性，但是因为结果中萃取回收率有差别，我们实验室有老师提出疑问说会影响线性。请问你们有遇到这种情况吗？
谢谢...

你的提取回收率是完全可以接受的，差异在10%以内，不会影响线性。
生物样本测试，标准曲线的准确度在85-115%都是可以接受的。
你说的稳定性问题，我已经在另外一个帖子说过了，室温放置6小时可以了。我长期做一期临床的生物测试，申报核查都没有问题。
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坚持
6楼2014-04-09 19:46:54
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carolbitch

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by rosegarden at 2014-04-09 19:46:54
你的提取回收率是完全可以接受的，差异在10%以内，不会影响线性。
生物样本测试，标准曲线的准确度在85-115%都是可以接受的。
你说的稳定性问题，我已经在另外一个帖子说过了，室温放置6小时可以了。我长期做一期 ...

请问您一下，我做实验遇到了回收率低浓度与中高浓度差别大的问题，低浓度只有70%而中高浓度有百分之九十，用的4倍甲醇沉淀蛋白，请问这是怎么回事呢？
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7楼2016-12-14 15:10:52
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