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861565768

铁虫 (小有名气)

[求助] 求助药代方法学回收率低的问题 已有3人参与

最近需要做一种天然成分的药代学分析,首先是方法的确立,在回收率这一块始终得不到很高的回收率,一般都是60%左右,试过蛋白质沉淀法,液液萃取法,还有沉淀萃取结合的方法,最终是蛋白质沉淀法回收率略高,可还是只有60%左右的回收率,怎么做都提高不了了,高中低浓度都一样。现在的问题是这个回收率做体内代谢显然不够,可是,如果是药物本身就很容易和血浆中的蛋白等物质结合,随着一起沉淀,那无论如何回收率都是上不去的啊,不知道这种情况可能存在么,应该怎么解决。
下面会尝试固相萃取,不过,如果药物结合的话,固相萃取得率也不会高吧,请教各位大神,因为我也是刚接触这方面的东西。
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
861565768: 金币+1, 有帮助, 非常感谢您的帮助 2014-11-05 19:18:29
你的化合物是什么类型的,能用液液萃取最好,相对比蛋白沉淀法蛋白除得干净一点。
固相萃取的成本很高,如果不差钱那另说。
可以考虑换萃取剂。
2楼2014-11-05 19:14:55
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wdl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
现行的生物样品分析方法的验证(化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则)没有对收回率指定数值,只要求高中低浓度回收率接近即精密且可重复,不像以前必须>70%,所以你的方法回收率只要能满足你的分析方法后面检测就行,但如果后面检测满足不了,就需要提高回收率或者进一步浓缩处理。

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4楼2014-11-06 11:47:41
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861565768

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-11-05 19:14:55
你的化合物是什么类型的,能用液液萃取最好,相对比蛋白沉淀法蛋白除得干净一点。
固相萃取的成本很高,如果不差钱那另说。
可以考虑换萃取剂。

是一种多酚类物质,极性也不弱。试过液液萃取法,先用三氯乙酸沉淀再用乙酸乙酯萃取,结果回收率反而不如直接甲醇沉淀高
世界那么乱、装纯给谁看、、、
3楼2014-11-05 19:18:14
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861565768

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by wdl at 2014-11-06 11:47:41
现行的生物样品分析方法的验证(化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则)没有对收回率指定数值,只要求高中低浓度回收率接近即精密且可重复,不像以前必须>70%,所以你的方法回收率只要能满足你的分析方法后面 ...

谢谢您,很受用

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5楼2014-11-06 12:26:43
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861565768

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 861565768 at 2014-11-06 12:26:43
谢谢您,很受用
...

有没有具体的文献或者标准支持这种做法呢

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6楼2014-11-06 12:27:17
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861565768

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wdl at 2014-11-06 11:47:41
现行的生物样品分析方法的验证(化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则)没有对收回率指定数值,只要求高中低浓度回收率接近即精密且可重复,不像以前必须>70%,所以你的方法回收率只要能满足你的分析方法后面 ...

找到了,谢谢您

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7楼2014-11-06 12:44:07
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wdl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

http://www.cde.org.cn/zdyz.do?method=largePage&id=2056
上面链接里面的附件下下来,方法中有具体描述。
8楼2014-11-06 12:44:45
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湖海散人

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
60%对于方法回收率来说已经是够的了,只要你验证这个60%回收率是稳定的就ok了,杂志不会说什么的,我的回收率只有55%

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看看
9楼2014-11-07 11:03:28
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861565768

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by 湖海散人 at 2014-11-07 11:03:28
60%对于方法回收率来说已经是够的了,只要你验证这个60%回收率是稳定的就ok了,杂志不会说什么的,我的回收率只有55%

太谢谢你了,我rsd是3%,加样回收标准曲线R2有三个9,就是感觉不踏实,这样就可以快点做体内了

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10楼2014-11-07 12:24:00
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