| 查看: 816 | 回复: 1 | ||||
[交流]
插入失活筛选 已有1人参与
|
| 本人最近在做乳酸菌的基因敲除实验，基础知识比较薄弱，用的方案是插入失活，在目的基因的中间插入四环素抗性基因，电转后平板上会长几个单菌落，接到液体里会长（含四环素抗性）然后PCR验证四环素基因都有，但是P目的基因+四环素却没有，求助大神指点一二，是否是我筛选方法有问题？还是另有其他的筛选方法？还有就是能P出四环素基因，是否证明该质粒已经整合到染色体的目的基因处？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 敲除验证 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
ankey呦» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有54人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请虫友帮我看下论文二审的意见
已经有3人回复
- PET28载体的T7启动子是T7还是T7lac启动子？表达时需不需要IPTG诱导？
已经有6人回复
- 蛋白超声会失活吗？
已经有8人回复
- 关于双酶切的酶的失活问题
已经有6人回复
- 这是几道道分子生物学考研的填空题，求大神帮忙回答下
已经有3人回复
- 什么是SD培养基？配置方法，筛选原理。我整理下了，免得大家老是来问了。
已经有24人回复
- 求助高手指点有关基因敲除
已经有8人回复
- 如何失活耐高温酶
已经有19人回复
- 基因插入突变的一点疑惑？
已经有7人回复
- 想知道某种微生物代谢产物的产生基因并对该基因进行研究，该如何操作？论文也行
已经有6人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 基因敲除细胞阳性纯和子筛选
已经有10人回复
- 【求助/交流】线性化质粒转化枯草方法
已经有7人回复
- 【求助/交流】基因敲除试验
已经有23人回复
- 【求助/交流】关于基因敲除的方法
已经有18人回复
2楼2015-03-27 10:13:44
5