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插入失活筛选 已有1人参与
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| 本人最近在做乳酸菌的基因敲除实验，基础知识比较薄弱，用的方案是插入失活，在目的基因的中间插入四环素抗性基因，电转后平板上会长几个单菌落，接到液体里会长（含四环素抗性）然后PCR验证四环素基因都有，但是P目的基因+四环素却没有，求助大神指点一二，是否是我筛选方法有问题？还是另有其他的筛选方法？还有就是能P出四环素基因，是否证明该质粒已经整合到染色体的目的基因处？ |
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 敲除验证 |
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2楼2015-03-27 10:13:44
