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puresnowlqin

金虫 (小有名气)

[求助] 凯氏定氮法测定蛋白的一些问题

本人最近在用凯氏定氮法测定蛋白，遇到一些问题，还希望有做过这个实验的有经验的虫友不吝赐教。
1. 实验中发现470℃消化60min左右溶液澄清透明了，然后冷却后就接着做蒸馏，蒸馏到200mL（前面已经加了50mL的2%硼酸）停止，最后滴定计算蛋白含量。但是得到的结果比产品说明上的要小10%左右，不知道问题出在哪里？后面增加20min消化时间，蒸馏到250mL，结果还是偏低。PS：实验的平行度还是可以的。
2. 测定过程中的消化、蒸馏、滴定都是很重要的，到底哪一步最关键，最影响实验结果？我的问题到底出在哪里了呢？
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1楼 2014-11-04 09:16:11
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angelin5770

铜虫 (小有名气)
请问您问题解决了吗？我也遇到了同样的问题，也不清楚原因在哪
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2楼2014-11-17 21:32:31
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puresnowlqin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by angelin5770 at 2014-11-17 21:32:31
请问您问题解决了吗？我也遇到了同样的问题，也不清楚原因在哪

嗯，基本上是查到了。但是还需要进一步确认。我们的消化炉加热效果不好，厂家要来换新的，还没换所以后面的验证试验还没做。
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3楼2014-11-18 08:25:52
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puresnowlqin

金虫 (小有名气)
补充一下：前面说的是我们最初的试验结果，后来消化炉子越来越不好，每管样品忽高忽低，后来干脆酱油色好久好久都不变色，所以消化的问题比较大。蒸馏的已经用硫酸铵验证过还可以的。
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4楼2014-11-18 08:29:59
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puresnowlqin

金虫 (小有名气)
后来又遇到一个新的问题：同时做了4个同样的样品，其中有一管在蒸馏加碱的时候加到消化管满了都一直是蓝色的不会变成褐色，其他三管是正常的。这种情况还是第一次遇到，到底是什么原因呢？
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5楼2014-11-20 15:07:19
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