24小时热门版块排行榜    

查看: 2659  |  回复: 29
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)

[求助] HRP标记抗体 已有4人参与

大家好,最近做HRP标记抗体,参照的是Bioconjugate Techniques,3rd Edition和Thermo的sulfo-SMCC的说明书,可是经过ELISA检测,完全没标上。请问大家有做过这个标记的吗?是什么样的流程呢?哪个步骤是最关键的环节?
拜托拜托~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

专业相关

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfeqhl

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


maweisimple: 金币+1, 有帮助 2014-12-02 15:45:03
我们用的高碘酸钠法,效价在1:5000到1:10000之间,当然你的抗体得好

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2014-11-19 17:43:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答

ldnh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
maweisimple: 金币+4, ★★★很有帮助, 简洁明了,谢谢! 2014-11-03 13:38:36
1.HRP分子上缺少能反应的氨基。2.SMCC是一种异型双功能基团,一端和氨基反应,另一端和巯基反应。3.天然IgG上也缺少能反应的自由巯基,要利用DTT或其他一些试剂修饰出能反应的自由巯基。4.一般HRP标记IgG,先用高碘酸钠氧化HRP,产生醛基,醛基能和IgG上富含的氨基生成席弗碱反应,从而达到耦联目的。
厚德载物,勤劳致富
2楼2014-11-03 10:50:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ldnh at 2014-11-03 10:50:37
1.HRP分子上缺少能反应的氨基。2.SMCC是一种异型双功能基团,一端和氨基反应,另一端和巯基反应。3.天然IgG上也缺少能反应的自由巯基,要利用DTT或其他一些试剂修饰出能反应的自由巯基。4.一般HRP标记IgG,先用高碘 ...

太悲催了,SMCC已经买完了,请问还有挽救的余地吗?
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
3楼2014-11-03 13:39:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ldnh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by maweisimple at 2014-11-03 13:39:06
太悲催了,SMCC已经买完了,请问还有挽救的余地吗?...

SMCC一般不用于抗体耦联HRP,其他酶类可以用这种方法。商品化的HRP标记二抗一般都用高碘酸钠氧化HRP,再耦联IgG.你可以试试这个方法。你是用来标记一抗吗?
厚德载物,勤劳致富
4楼2014-11-03 14:22:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 282求调剂 +4 2103240126 2026-03-02 6/300 2026-03-02 18:07 by 2103240126
[考研] 材料085601调剂 +3 多多子. 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:37 by yeahyou
[考研] 环境调剂 +3 chenhanheng 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:37 by houyaoxu
[考研] 289求调剂 +3 BrightLL 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:28 by 杨杨杨紫
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +6 pin8023 2026-02-28 8/400 2026-03-02 17:13 by 0854蹲调剂
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 14/700 2026-03-02 16:09 by 今夏不夏
[考研] 0856化工专硕求调剂 +15 董boxing 2026-03-01 15/750 2026-03-02 15:06 by 晃晃不许晃
[考研] 材料工程274求调剂 +4 Lilithan 2026-03-01 4/200 2026-03-02 12:06 by yuchj
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[考研] 材料类求调剂 +11 wana_kiko 2026-02-28 14/700 2026-03-02 08:46 by 聪明的大松鼠
[考研] 材料复试调剂 +4 学材料的点 2026-03-01 5/250 2026-03-02 08:26 by houyaoxu
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见