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liulifangxi

金虫 (初入文坛)

[求助] 关于酶与戊二醛交联剂的问题

如题,酶用戊二醛交联后,为什么还要在氨基乙酸溶液中交联未饱和的醛基,若没有进行饱和,会对酶的活性有什么影响?
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Ponyo

金虫 (小有名气)

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markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2012-03-21 09:39:54
做FET生物传感最后把多余的醛基钝化饱和掉是因为防止非特异性结合引起噪声信号,我觉得过多的醛基存在会影响酶的活性吧,个人观点
2楼2012-03-21 09:09:08
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0115402

铁杆木虫 (正式写手)

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为了保证酶与戊二醛交联完全,酶比较贵,用量少,戊二醛便宜,都是过量使用,过量部分的醛基需要用氨基乙酸溶液中的氨基来反应掉未交联的醛基部分,防止影响气候的测量。
3楼2012-03-21 10:33:20
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海角

木虫 (正式写手)

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markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2012-03-21 15:04:40
这纯粹是个化学问题,多余的醛基必须除去才能保持你的没的纯度,很可能影响酶活性,而且醛基的反应活性很高,可能在后续的使用中造成不良效果。
4楼2012-03-21 11:52:04
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liubin

专家顾问 (著名写手)

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markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2012-03-21 15:04:49
戊二醛 会让酶变性
所以,酶是被交联上去啦,但是 活性没有啦。
5楼2012-03-21 14:20:01
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

优秀超版优秀版主优秀区长

【答案】应助回帖


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markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2012-03-21 15:05:17
这个和酶的活性无关
如果酶的活性会下降,在你交联的过程中已经下降了
用氨基封端,是为了避免剩余醛基在未来的实验中参与反应,对你的后续试验有影响
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
6楼2012-03-21 15:00:51
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赖穗0911

新虫 (小有名气)

您好我目前做的是壳聚糖固定化酶  用的是戊二醛交联  先吸附上酶,再用一定浓度的戊二醛交联,交联12h后,就倒掉戊二醛了,在水洗,这样做戊二醛是不是已经将酶杀死了,怎样选择合适浓度的醛?以及用量?、/
求解答
7楼2014-06-23 13:42:01
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