24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2747  |  回复: 29
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)

[求助] HRP标记抗体 已有4人参与

大家好,最近做HRP标记抗体,参照的是Bioconjugate Techniques,3rd Edition和Thermo的sulfo-SMCC的说明书,可是经过ELISA检测,完全没标上。请问大家有做过这个标记的吗?是什么样的流程呢?哪个步骤是最关键的环节?
拜托拜托~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

专业相关

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ldnh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by maweisimple at 2014-11-03 13:39:06
太悲催了,SMCC已经买完了,请问还有挽救的余地吗?...

SMCC一般不用于抗体耦联HRP,其他酶类可以用这种方法。商品化的HRP标记二抗一般都用高碘酸钠氧化HRP,再耦联IgG.你可以试试这个方法。你是用来标记一抗吗?
厚德载物,勤劳致富
4楼2014-11-03 14:22:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答

ldnh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
maweisimple: 金币+4, ★★★很有帮助, 简洁明了,谢谢! 2014-11-03 13:38:36
1.HRP分子上缺少能反应的氨基。2.SMCC是一种异型双功能基团,一端和氨基反应,另一端和巯基反应。3.天然IgG上也缺少能反应的自由巯基,要利用DTT或其他一些试剂修饰出能反应的自由巯基。4.一般HRP标记IgG,先用高碘酸钠氧化HRP,产生醛基,醛基能和IgG上富含的氨基生成席弗碱反应,从而达到耦联目的。
厚德载物,勤劳致富
2楼2014-11-03 10:50:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ldnh at 2014-11-03 10:50:37
1.HRP分子上缺少能反应的氨基。2.SMCC是一种异型双功能基团,一端和氨基反应,另一端和巯基反应。3.天然IgG上也缺少能反应的自由巯基,要利用DTT或其他一些试剂修饰出能反应的自由巯基。4.一般HRP标记IgG,先用高碘 ...

太悲催了,SMCC已经买完了,请问还有挽救的余地吗?
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
3楼2014-11-03 13:39:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ldnh at 2014-11-03 14:22:17
SMCC一般不用于抗体耦联HRP,其他酶类可以用这种方法。商品化的HRP标记二抗一般都用高碘酸钠氧化HRP,再耦联IgG.你可以试试这个方法。你是用来标记一抗吗?...

也是标二抗的,HRP和SMCC都定完了,估计要被老板说了
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
5楼2014-11-03 16:35:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 论文撤稿了 +5 bjvtcliu 2026-05-24 8/400 2026-05-24 23:24 by zju2000
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 8/400 2026-05-24 22:10 by Max0601
[考博] 化学专业申博 +3 赵子羊 2026-05-23 4/200 2026-05-24 18:10 by 工大学长
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 1rx34o113h 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:41 by 0i3mu4vkjz
[基金申请] 评审有感 +16 popular289 2026-05-18 27/1350 2026-05-24 17:34 by hhs666
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:10 by 75ui6h7z2t
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 4/200 2026-05-24 16:16 by hhx1yx9evi
[基金申请] 河北省自然科学基金 +6 Peterchao 2026-05-18 9/450 2026-05-24 16:02 by 130067131
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 pmo95bazuy 2026-05-23 8/400 2026-05-24 15:56 by 1uy1ht2y9r
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路! +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀,有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
信息提示
请填处理意见