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hmmilier

金虫 (著名写手)

[求助] 请教各位高人关于碘显色测酶活的问题~~~ 已有1人参与

小虫最近在测定淀粉酶酶活,胞外酶与淀粉反应后用碘显色测定支链淀粉含量,但是发现碘与反应液接触后立即褪色至吸光值为0.000,灭酶对照组也是一样的情况。之前师姐测定胞内酶的酶活时没有发生这种情况,请问,是碘与胞外酶的培养基反应的原因么?(酶是同一种酶,只是宿主不一样所以有胞内胞外两种。。。)
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答非所问

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ET.....

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我也是做酶的,比较感兴趣,帮你高亮推荐下
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2楼2014-10-29 20:08:52
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hmmilier

金虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-10-29 20:08:52
我也是做酶的,比较感兴趣,帮你高亮推荐下

谢谢斑竹!
3楼2014-10-29 20:43:46
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答非所问

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3楼: Originally posted by hmmilier at 2014-10-29 20:43:46
谢谢斑竹!...

请问你的实验,有没有做重复试验?是不是试剂问题,你做的淀粉酶酶活,我还真没有测过
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4楼2014-10-29 21:13:50
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hmmilier

金虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-10-29 21:13:50
请问你的实验,有没有做重复试验?是不是试剂问题,你做的淀粉酶酶活,我还真没有测过...

做过很多次重复实验了,一直都是这个现象。也换个其它方法,但是不够稳定,还想尝试一下碘量法,所以就来请教一下各位这是什么原因,能不能解决~
5楼2014-10-29 21:41:22
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答非所问

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hmmilier: 金币+10, 有帮助 2014-10-29 21:59:29
我感觉是你,底物:淀粉选取的量不恰当(过少),所致,你的胞外酶把淀粉都氧化了,你的碘怎么可能显色呢、、
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6楼2014-10-29 21:56:49
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hmmilier

金虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-10-29 21:56:49
我感觉是你,底物:淀粉选取的量不恰当(过少),所致,你的胞外酶把淀粉都氧化了,你的碘怎么可能显色呢、、

之前也这么认为过,但是相比于胞内酶,胞外酶的电泳条带非常浅且细,胞外酶的酶活应该不会高于胞内酶的~~
7楼2014-10-29 22:01:49
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答非所问

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这次你的体系(总体积,底物浓度,以及碘浓度)和你师姐的都是一样的?
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8楼2014-10-30 09:01:36
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引用回帖:
8楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-10-30 09:01:36
这次你的体系(总体积,底物浓度,以及碘浓度)和你师姐的都是一样的?

一样的呢。在尝试改变之前的体系试一下~
9楼2014-10-30 09:18:08
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答非所问

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引用回帖:
9楼: Originally posted by hmmilier at 2014-10-30 09:18:08
一样的呢。在尝试改变之前的体系试一下~...

是的,你可以试着略微改变下体系试下
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10楼2014-10-30 12:16:03
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