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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 梯度洗脱还有等度洗脱~还有电信号强弱问题
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wo的海宝圆圆

新虫 (小有名气)

[交流] 梯度洗脱还有等度洗脱~还有电信号强弱问题

我测量的六种胆盐~参照一篇外文文献，人家用的两种流动相都是乙腈和水混合物还都加了离子对试剂。。。这样做的话电信号强度很大，但是基线一直冲不平，单样品分析的时候还基线漂移特别严重，于是在请教了老师之后，我把流动相改成了一个纯乙腈，一个加了离子对试剂的水溶液，相对应的梯度变换也改了，但是感觉用标品做的信号强度没之前峰高了，而且换了两相后，梯度变化就不太明显，只变了百分之十几~我有两个问题：
第一，变化这么小，我要不改成出峰开始的比例直接跑等度可以么
第二，电信号强弱影响我的实验数据不，据我师姐告诉我说没关系，说只要根据这些数据把标准曲线做出来，对应的找着浓度就可以了，是这样的么
希望懂的虫友给予帮忙，谢谢
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1楼 2014-10-25 15:27:14
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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引用回帖:
7楼: Originally posted by wo的海宝圆圆 at 2014-10-25 21:40:00
昨天用215nm试了一下，都没有在200nm下的峰面积大~就是甘氨胆酸钠，牛黄胆酸钠，还有类似的物质~...

我觉得你可能需要做衍生，或者用质谱测。如果是用离子对试剂的话只能长时间平衡直到基线平稳，再就是注意别让盐析出。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
8楼2014-10-25 21:56:43
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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wo的海宝圆圆: 金币+3 2014-11-24 18:34:57
大部分情况下梯度洗脱都比等度洗脱响应高，几十倍甚至上百倍的我都见过。但是假如响应能够满足检测需求也没必要追求太高的响应，也就是定量限的响应足够就行。
还有，不建议分开水相和有机相，因为这样流动相在仪器内部混合的时候离子对试剂可能会析出，文献上两个流动相都含有水相和有机相并且加入离子对试剂是常用的模式。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2014-10-25 19:03:57
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wo的海宝圆圆

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2014-10-25 19:03:57
大部分情况下梯度洗脱都比等度洗脱响应高，几十倍甚至上百倍的我都见过。但是假如响应能够满足检测需求也没必要追求太高的响应，也就是定量限的响应足够就行。
还有，不建议分开水相和有机相，因为这样流动相在仪器 ...

上次用了这两个盐溶液，基线一直跑不平。。。根本没法进样，什么情况，请问该如何调整，而且到后来冲柱子一直冲不平，我的波长是200nm，是不是波长太短的原因啊~我的梯度洗脱是其中一相30min内从10%升到了70%，基线漂移特别严重。。。哎，就是因为这样，我才想办法进行调整的，可是峰的响应面积明显没有以前的大了~
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3楼2014-10-25 19:35:29
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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wo的海宝圆圆(费姚永芬代发): 金币+3 2014-10-27 10:34:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by wo的海宝圆圆 at 2014-10-25 19:35:29
上次用了这两个盐溶液，基线一直跑不平。。。根本没法进样，什么情况，请问该如何调整，而且到后来冲柱子一直冲不平，我的波长是200nm，是不是波长太短的原因啊~我的梯度洗脱是其中一相30min内从10%升到了70%，基线 ...

梯度洗脱基线肯定会漂。波长的确挺短，你测的物质不会是那种紫外吸收很弱的吧？
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
4楼2014-10-25 20:03:17
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